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秋水仙素诱导优质抗热同源四倍体不结球白菜的创制与特性研究

一、引言

1.1研究背景与目的

不结球白菜（Brassicacampestrisssp.chinensis），作为十字花科芸薹属芸薹种的重要亚种，是一、二年生草本植物，在蔬菜生产与消费领域占据着举足轻重的地位。因其生长周期短，通常30-60天即可收获，能快速为市场提供新鲜蔬菜；单位面积产量高，在合理的种植管理条件下，每亩产量可达数千公斤；且易栽培，对土壤、气候等环境条件具有一定的适应性，在我国中部及以南地区实现了周年栽培种植。从市场份额来看，其已成为我国第三大蔬菜作物，2021年全国栽培面积达到133.33万hm2，较2005年大幅提高了2.5倍，广泛的种植面积充分体现了其在蔬菜市场中的重要性。不仅在国内深受欢迎，还大量出口到日本、韩国、东南亚等国家和地区，已然成为一种全球性的蔬菜作物。不结球白菜富含多种对人体有益的营养成分，如矿物质（钙、铁、钾等）、膳食纤维、维生素（维生素C、维生素K、维生素B族等）。这些营养物质对调节人体酸碱平衡起着关键作用，有助于维持身体内环境的稳定；能够促进新陈代谢，保障身体各项生理功能的正常运行；在预防疾病方面也功效显著，如维生素C具有抗氧化作用，能增强免疫力，预防感冒等疾病，膳食纤维可促进肠道蠕动，预防便秘和肠道疾病。

然而，在不结球白菜的种植过程中，面临着诸多严峻的问题。其耐热性较差，在25℃以上的高温天气下，生长会受到明显抑制，植株生长衰弱，光合作用效率降低，呼吸作用增强，消耗过多的光合产物，导致植株生长缓慢、矮小，同时极易感染病毒病，造成叶片皱缩、畸形、黄化，严重影响产量与品质，在夏季高温季节，产量损失可达30%-50%。而且，不结球白菜存在低产、低品质、抗病性差等问题。在产量方面，受到品种特性、种植技术、环境条件等多种因素限制，部分品种的产量难以满足市场需求；品质上，一些不结球白菜口感欠佳、营养成分含量不足；抗病性差使得其在生长过程中易受多种病害侵袭，增加了种植成本和管理难度。

多倍体育种作为一种有效的植物遗传改良手段，能够显著改变植物的农艺性状和品质特性。同源四倍体植物通常具有巨大性，其器官如叶片、果实等往往比二倍体更大，这可能带来产量的提升。例如，同源四倍体不结球白菜的叶片长和宽、叶柄长和宽、花器官、气孔、花粉粒、叶重、柄重、开展度、单株重均比二倍体增加或增大。而且，同源四倍体在营养品质方面也有显著优势，其可溶性总糖、可溶性蛋白、干物质等含量会增加，有机酸含量降低，使得口感和营养价值得到提升。同时，多倍体植物还可能具有更强的抗逆性，包括抗热、耐寒、抗病等能力，这对于应对日益变化的环境条件和减少病虫害损失具有重要意义。

本研究旨在通过秋水仙素诱导等技术，创制优质同源四倍体不结球白菜，并深入研究其抗热性能。具体目标包括：成功诱导出同源四倍体不结球白菜，并通过准确的倍性鉴定方法确定其染色体倍数；详细比较二倍体与同源四倍体不结球白菜在农艺性状、营养品质等方面的差异，明确同源四倍体的优势特性；系统研究热胁迫下，同源四倍体不结球白菜在生理生化指标、基因表达等方面的变化，揭示其抗热机制；基于研究结果，筛选出具有优良抗热性能和品质的同源四倍体不结球白菜材料，为不结球白菜的品种改良和推广应用提供理论依据和实践基础。

1.2国内外研究现状

在不结球白菜多倍体育种方面，国内外学者开展了大量研究。早在20世纪，国外就开始了对芸薹属植物多倍体的探索，通过秋水仙素处理等方法诱导染色体加倍，获得了一些多倍体材料。国内在不结球白菜多倍体育种领域也取得了显著成果。南京农业大学自1980年起，历经20年联合攻关，在国内外首次育成9个同源四倍体不结球白菜品种，如“南农矮脚黄”“热优2号”等。这些四倍体品种与二倍体相比，具有生长迅速、产量高、品质佳、抗逆性强等特点。研究表明，利用不同浓度秋水仙素处理子叶期不结球白菜生长点，浓度为0.2%的秋水仙素处理4次时，四倍体诱变率可达8.42%。在倍性鉴定方面，常用的方法有形态解剖学鉴定，四倍体植株叶片、花器官、气孔等表现出巨大性，气孔密度降低；细胞学鉴定，通过观察根尖染色体数目，四倍体植株根尖染色体数目为二倍体植株两倍；流式细胞仪鉴定，四倍体植株荧光强度为二倍体两倍，这些方法为准确鉴定不结球白菜的倍性提供了保障。

在不结球白菜抗热性研究方面，国内研究较为深入。有研究对不结球白菜在长江中、下游地区夏季高温季节栽培条件下的苗期、成株期的形态、生理生化特性和种子活力与热害指数的相关性进行了研究。结果表明，苗期热害指数与不同移栽时间的植株的热害指数的相关性随着移栽时间的延长而降低；成株期的形态指标，如叶片面积、叶片重、叶柄重、叶柄厚、单株重