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生物化学实验复习题试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.在蛋白质电泳中，使用聚丙烯酰胺凝胶的主要优势之一是（）。

A.分离范围广

B.操作简单快速

C.可用于从小分子到大分子的分离

D.电泳速度快

2.下列哪种缓冲液系统最适合在pH6.0左右使用？（）

A.Tris-HCl(pKa≈8.1)

B.Phosphate(pKa1≈2.1,pKa2≈7.2)

C.Acetate(pKa≈4.7)

D.Citrate(pKa1≈3.1,pKa2≈4.6,pKa3≈6.4)

3.离心机的转速（RPM）与有效离心力（相对离心力，RCF）的关系是（）。

A.成正比

B.成反比

C.与半径成正比，与转速平方成正比

D.与半径成反比，与转速平方成反比

4.在进行分光光度法测定时，若测定波长位于样品最大吸收波长处，则样品的吸光度值（A）与浓度（c）的关系遵循（）。

A.Beer-Lambert定律

B.Michaelis-Menten方程

C.Henderson-Hasselbalch方程

D.Langmuir方程

5.蛋白质凝胶过滤层析（FPLC）分离蛋白质的主要原理是（）。

A.蛋白质分子与填料发生特异性相互作用

B.蛋白质分子的大小不同，其在填料床中受阻滞的程度不同

C.蛋白质分子带电性质不同，在电场中迁移速度不同

D.蛋白质分子在洗脱液中的溶解度不同

6.下列哪种试剂常用于蛋白质的定性鉴定？（）

A.碘液

B.斐林试剂

C.双缩脲试剂

D.苏丹Ⅲ试剂

7.酶促反应动力学中，米氏常数（Km）表示（）。

A.酶的最大反应速率

B.酶的催化效率

C.底物浓度达到酶活性一半时的浓度

D.反应达到平衡时的底物浓度

8.在进行核酸电泳时，通常使用（）作为支持介质？

A.硅胶

B.滤纸

C.琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶

D.沙滤板

9.保存生物样品（如酶、核酸）时，通常加入甘油的主要目的是（）。

A.增加样品体积便于操作

B.提供缓冲环境

C.降低冰点，防止冻伤

D.溶解样品

10.实验室中使用移液管吸液时，为准确起见，应（）。

A.快速吹出液体

B.使液面下降速度均匀

C.将移液管尖端完全浸入液面以下再吸液

D.直接接触容器内壁吸液

二、填空题（每空1分，共15分）

1.蛋白质变性是指蛋白质的______结构或______结构被破坏，导致其理化性质发生改变的现象。

2.在进行酶活性测定时，为防止酶被降解，常需在反应体系中加入______等保护剂。

3.离心时，样品在管底受到的力称为______，它与转速和离心半径有关。

4.配制缓冲液时，通常需要计算缓冲对的______和______。

5.脱盐层析是一种常用的______方法，利用填料对蛋白质和杂质的______差异进行分离。

6.在使用分光光度计时，应选择合适的比色皿，且必须使用______进行调零。

7.纸层析法分离化合物是基于样品中各组分在固定相和流动相中______的差异。

三、判断题（对的划“√”，错的划“×”，每题1分，共10分）

1.碱性蛋白在pH7.0的磷酸盐缓冲液中带正电荷。（）

2.离心机转速越高，样品的沉淀效果越好。（）

3.所有的生物化学反应都适合用米氏方程来描述。（）

4.琼脂糖凝胶电泳比聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨率更高。（）

5.实验室废弃物可以直接倒入下水道。（）

6.使用移液管时，必须等到液面完全静止后再读取刻度。（）

7.蛋白质的等电点是指其净电荷为零时的pH值。（）

8.在进行分光光度法测定时，必须使用空白溶液进行调零。（）

9.超速离心机可以达到每分钟数万甚至数十万转的速度。（）

10.所有酶都需要辅酶或辅基才能发挥催化活性。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述影响蛋白质变性因素的主要有哪些？

2.简述在生物化学实验中，如何防止样品（特别是酶）的降解？

3.简述凝胶过滤层析（GelFiltrationChromatography）的基本原理及其应用。

4.简述