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2025年大学《生物科学》专业题库——基因工程技术在生物医学中的应用

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、名词解释（每小题3分，共15分）

1.基因工程

2.限制性内切酶

3.载体

4.PCR（聚合酶链式反应）

5.基因治疗

二、简答题（每小题5分，共20分）

1.简述利用基因工程技术进行基因克隆的基本步骤。

2.列举三种基因诊断的主要方法，并简述其基本原理。

3.简述腺病毒作为基因治疗载体的主要特点。

4.基因编辑技术与传统的基因工程技术（如基因克隆）相比，有哪些显著的优势？

三、论述题（每小题10分，共30分）

1.结合具体实例，论述基因工程技术在开发新型疫苗方面的应用。

2.分析基因治疗目前面临的主要技术挑战和伦理争议。

3.谈谈你对合成生物学在未来个性化医疗中潜在作用的理解。

试卷答案

一、名词解释（每小题3分，共15分）

1.基因工程：也称基因重组技术，是指运用生物技术手段，在体外将不同来源的基因进行切割、拼接和重组，然后导入到宿主细胞中，使外源基因在宿主细胞内稳定维持、表达和遗传，从而改变生物体的遗传特性，获得具有特定遗传性状产品的生物技术。

**解析思路：*考察对基因工程基本概念的理解，需包含核心操作（切割、拼接、重组）、技术手段（生物技术）、操作对象（不同来源基因）、转化过程（导入宿主细胞）、结果（改变遗传特性）和目的（获得特定性状产品）等关键要素。

2.限制性内切酶：是一种能识别并切割双链DNA分子特定位点的核酸内切酶，其识别位点通常具有特定的回文结构。每种限制性内切酶都有其独特的识别序列和切割方式（stickyend或bluntend），是基因工程中最常用的工具酶之一。

**解析思路：*考察对限制性内切酶定义和特性的掌握。需明确其作用对象（双链DNA）、识别特征（特定位点、回文结构）、特异性（识别特定序列）和切割结果（粘性末端或平末端）。

3.载体：是指能够携带外源DNA片段进入宿主细胞并使其在宿主细胞内稳定复制和表达的分子。常用的载体包括质粒、噬菌体、病毒等。

**解析思路：*考察对载体功能的理解。需包含其核心作用（携带外源DNA）、进入宿主细胞的能力（转移能力）以及在宿主细胞内的行为（稳定复制、表达）。

4.PCR（聚合酶链式反应）：是一种在体外模拟生物体内DNA复制过程，利用DNA聚合酶、特异性引物和脱氧核苷酸，通过温度循环的方式，使特定DNA片段进行enzymatic合成和扩增的分子生物学技术。

**解析思路：*考察对PCR技术原理和组成的掌握。需明确其核心功能（特异性扩增DNA片段）、关键组分（DNA聚合酶、引物、dNTPs）和基本过程（温度循环）。

5.基因治疗：是指将外源正常基因导入到有基因缺陷的细胞或个体中，以纠正或补偿缺陷基因的功能，从而达到治疗疾病目的的一种生物医学技术。

**解析思路：*考察对基因治疗核心概念的把握。需明确其基本操作（导入正常基因）、治疗对象（基因缺陷细胞或个体）和治疗目的（纠正或补偿缺陷基因功能，治疗疾病）。

二、简答题（每小题5分，共20分）

1.简述利用基因工程技术进行基因克隆的基本步骤。

*①目的基因的获取：通过PCR扩增、基因组文库或cDNA文库筛选等方法获得目的基因片段。

②载体的选择与改造：选择合适的载体（如质粒），并在载体上引入限制性内切酶切割位点，有时还需连接多克隆位点（MCS）。

③目的基因与载体的连接：使用同一种或兼容性限制性内切酶切割目的基因和载体，使两者产生互补的单链粘性末端或平末端，在DNA连接酶的作用下形成重组DNA分子（重组质粒）。

④重组质粒的导入宿主细胞：将重组质粒导入到感受态细菌（或其他宿主细胞）中，常用方法是热激法或钙离子法（CaCl2法）。

⑤重组体的筛选与鉴定：通过抗生素抗性筛选、蓝白斑筛选或其他标记（如荧光标记）等方法筛选出成功导入重组质粒的宿主细胞（转化子）。随后通过分子生物学方法（如PCR、限制性酶切分析、核酸测序）对插入的目的基因进行鉴定。

**解析思路：*考察基因克隆的经典流程，要求按逻辑顺序列出关键步骤，并简要说明每步的操作目的和方法。需覆盖从基因获取到最终筛选鉴定的全过程。

2.列举三种基因诊断的主要方法，并简述其基本原理。

*①PCR及其衍生技术：基本原理是利用特异性引物在高温、酶、dNTP等条件下，选择性扩增样本中目标DNA片段。可用于检测病原体DNA、遗传病相关基因突变等。例如，PCR-荧光探针