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提高发酵产率与速度的措施

【摘要】伴随着生命科学与生物技术的迅猛发展，发酵技术及相关应用领

域的研究也越来越活跃。发酵技术不仅是工业生物的技术的重要部分，更是生物

技术产业化的关键。因此研究提高发酵产率与速度的方法是重中之重，本文对什

么是发酵、发酵工程动力学进行了简要概述，特别介绍了一些有关提高发酵产率

与速度的措施。

【关键词】

发酵；发酵动力学；发酵产率；措施

0引言

发酵一词最初来源于拉丁文“fervere”，是用来描述人们在看到果汁或麦芽汁

经过酵母菌的作用出现的“沸腾”现象。这种现象实际上是由于酵母菌作用于果

汁或麦芽汁中的糖，在厌氧条件下代谢产生了二氧化碳气泡引起的。随后，人们

将这种现象成为“发酵”。但一直以来生物化学家与工业微生物学家对发酵给出

了不同的定义。从生化角度来说，发酵是指在无氧条件下一个有机化合物能同时

作为电子和最终电子受体并产生能量的过程。而酵母菌的乙醇发酵过程就是生物

化学意义上典型的“发酵”。从工业微生物的角度来说，发酵则指所有通过大规

模培养微生物来生产产品的过程。这当中包括微生物的厌氧发酵，也包括好氧发

酵。例如谷氨酸棒杆的谷氨酸发酵过程就是典型的工业微生物学定义中的“发

酵”。简而言之，生物化学家认为“发酵”是酵母菌在无氧状态下的呼吸过程，

是生物获得能量的一种形式。现代发酵的定义则将利用微生物在有氧或无氧条件

下的生命活动来制造产品的过程叫做发酵。

伴随着生命科学与生物技术的迅猛发展，发酵技术及相关应用领域的研究也

越来越活跃。而微生物的发酵与人类的关系非常密切，因此利用微生物发酵来生

产各种有用产品是当今国内外主要的研究和开发方向。以工业微生物为例，选育

优良菌种仅是一个开始，要使优良的菌种潜力充分发挥出来，这就需要我们对优

化发酵过程来提高发酵产率和速度进行深入的研究和实验。发酵优化过程主要涉

及四方面的研究，一是细胞的生长过程研究；二是微生物反应的化学计量；三是

生物反应动力学；四是生物反应器工程。

1优化细胞生长过程提高发酵产率和速度

要提高发酵产率和速度，首先要对微生物生长的物理和化学环境进行优化，

包括生长培养基的组成，培养物理参数（pH、温度和搅拌）及产物诱导条件。

优化这些参数的目的在于保证细胞生长的环境条件之下，避免营养物过量和不

足、防止产物降解以及减少有毒产物的形成。

1.1培养基组成的优化

培养基通常含有碳源、氮源，以微营养（如维生素和微量元素），这些营养物

的浓度与比例，对实现生产重组微生物的高密度发酵是很重要的。例如，过量的

Fe2+和CaCO与相对低浓度的磷酸盐可促进黄曲霉生产L-苹果酸；链霉菌在

3

60-80mmol/LCO2-存在下，其丝氨酸蛋白酶生产力可提高10倍之多；在重组微生

3

物达到高细胞密度后，限制磷酸盐浓度虽然会抑制细胞的生长，但比起精氨酸充

足时细胞生长优良的情况，其重组α-淀粉酶的产量可提高2倍。

1.2特殊营养物的添加

在某些情况下，向培养基中添加一些有营养物质能提高生产率。这些营养物

的作用有可能是作为产物的前体，也有可能是组织产物的降解。例如，在培养重

组大肠杆菌生产氯霉素乙酰转移酶β-内酰胺酶的培养基中添加60g/L的葡萄糖

和100mmol/L的磷酸钾能使重组蛋白的稳定性显著提高。其原因可能是由于宿

主细胞产生的多种胞外蛋白酶的活性被抑制，从而防止了重组蛋白的降解。

1.3限制代谢副产物的积累

培养条件的控制对代谢副产物的形成影响甚大。在分批或流加培养中，某些

营养产物的浓度过高会导致Crabtree效应的产生。在这种效应下，酿酒酵母会产

生乙醇，大肠杆菌则会产生大量乙酸，一旦生成乙酸，细菌的生长及重组蛋白的

生产会受到抑制。大肠杆菌形成乙酸的速度依赖于细胞生长速度和培养基组成。

也已确证，如果在培养基中添加复合营养物（如大豆水解物），则会增加乙酸积

累量。针对如何减轻由于乙酸积累而产生的负面影响。众多研究者进行了大量工

作，如利用循环发酵技术来限制乙酸在重组大肠杆菌高密度培养中的积累。近来

也有研究表明，添加某些氨基酸能减少乙酸的抑制作用。如在培养基中添加

10mg/L的甘氨酸能显著促进大肠杆菌合成重组α-淀粉酶和β-内酰胺酶，并能

刺激酶从周质培养中释放，但此时仍有乙酸伴随生成。

2微生物反应化学计量恒算来改善发酵产率和速度

微生物利用底物进行生长，同时合成代谢