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結合相游離相ELISA間接法夾心法競爭法二、免疫細胞檢測技術1、細胞表面標誌檢測2、細胞功能檢測3、細胞因數檢測常用的免疫細胞表面標誌檢測技術一、免疫標記檢測1、螢光抗體法2、酶免疫檢測法3、免疫金銀染色法二、補體依賴的細胞毒試驗(CDC)三、E花環形成試驗SmIg的螢光抗體檢測法SmIg的酶免疫檢測法補體依賴的細胞毒試驗(CDC)染料補體E-花環T細胞B細胞花環形成細胞綿羊紅細胞一、轉化、增殖試驗1、淋巴細胞轉化試驗2、混合淋巴細胞培養二、細胞毒檢測1、T細胞介導的細胞毒試驗2、NK活性測定3、ADCC作用測定常用的免疫細胞功能檢測技術放射性測定3H-TdR絲裂原(抗原)刺激淋巴細胞轉化試驗原理示意放射性測定細胞毒試驗原理示意靶細胞效應細胞分離上清可檢測的細胞因數白細胞介素(Interleukin)——IL-1、IL-2、……IL-18干擾素(Interferon)——IFN-?、IFN-?、IFN-?腫瘤壞死因數(Tumornecrosisfactor)——TNF-?、TNF-?集落刺激因數(Colony-stimulatingfactor)——M-CSF、G-CSF轉化生長因數(Transforminggrowthfactor)——TGF-?趨化因數(Chemokine)——IL-8、GROs、MCP-1生長因數(Growthfactor)——EGF、FGF、IGF、PDGF細胞因數檢測的特點1、免疫原性較弱2、樣品含量低3、樣品具有時效性4、生物效應特異性差細胞因數檢測的方法1、免疫標記技術檢測——抗原性測定2、細胞生物學方法檢測——生物活性測定3、分子生物學技術檢測——mRNA表達測定特異性免疫獲得方式:自然免疫、人工免疫自然被動免疫:如胎兒從母體獲得IgG嬰兒從母體獲得IgM自然自動免疫:感染病原體後獲得免疫力人工自動免疫:接種類毒素、疫苗等人工被動免疫:注射抗毒素、丙種球蛋白等第二節???免疫預防思考題:1.你知道注射“乙肝疫苗、卡介苗、白白破三聯疫苗”的目的是什麼?機制?屬於何種免疫?2.你知道注射“丙球、胎盤球蛋白、抗毒素、IL-2、IFN”的目的是什麼?機制?屬於何種免疫?3.注射疫苗和注射丙球等製劑獲得免疫力的方式各有什麼特點?4.請你舉一個實例說明何時使用疫苗、何時使用丙球等製劑?理由及注意事項。人工免疫定義:根據特異性免疫應答的原理,採用人工方法將Ag/Ab製成各種製劑,接種於人體,使其產生/獲得特異性免疫力,達到預防某些疾病的目的。分類:1、人工主動免疫用疫苗或類毒素等抗原接種機體,使之產生特異免疫,從而預防感染的措施。2、人工被動免疫用抗體或細胞因數等製劑,使之獲得特異免疫,以治療或緊急預防感染的措施。一、人工主動免疫
(artificialactiveimmunity):定義:人工主動免疫將疫苗(vaccine)或類毒素接種於人體,使機體產生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施,主要用於預防。人工主動免疫生物製劑:滅活疫苗(死疫苗):選用免疫原性強的細菌,經人工大量培養後,用理化方法殺死而成。減毒活疫苗:用減毒或無毒力的活病原體製成。類毒素:細菌外毒素經0.3%-0.4%甲醛液作用3-4周後,毒性消失但仍保持免疫原性。亞單位疫苗:根據細菌抗原分析,查明不同致病菌的主要保護性免疫原存在的組分,然後將之製成的疫苗。DNA重組疫苗:通過DNA重組技術製備所需的疫苗。核酸疫苗:或稱DNA疫苗、基因疫苗,是將能編碼引起保護性免疫應答的病原體免疫原基因片段和質粒載體直接注射入宿主體以表達目的免疫原,進而誘導出體液和細胞免疫的新型疫苗。治療性疫苗免疫學應用第一節免疫學診斷一、抗原抗體的檢測二、淋巴細胞的檢測一、抗原抗體的檢測原理:Ag與相應Ab在體內與體外可發生特異性結合檢測原則:1.已知Ag檢測未知Ab2.已知Ab檢測未知Ag細菌學診斷標本採集時應注意無菌操作,儘量避免雜菌污染。根據致病菌在不同病期的體內分佈和排出部位,採取不同標本。應在使用抗菌藥物前採集標本,否則在培養時應加入拮抗劑。盡可能採集病變明顯部位的材料。標本必須新鮮,採集後儘快送檢。送檢過程中要採取適當的保存方式。標本採集與送
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