第二讲免疫器官的观察与免疫细胞的分离.ppt

DepartmentofImmunology第1页，共30页，星期日，2025年，2月5日第二讲

免疫器官的观察与

免疫细胞的分离第2页，共30页，星期日，2025年，2月5日实验目的掌握小白鼠的捉拿与处死方法掌握免疫细胞分离的方法及其效果的判断熟悉血细胞计数板的构造及使用方法第3页，共30页，星期日，2025年，2月5日免疫器官的观察第4页，共30页，星期日，2025年，2月5日免疫细胞种类第5页，共30页，星期日，2025年，2月5日免疫细胞分离技术

密度梯度离心法免疫吸附分离法荧光激活细胞分选仪分离法磁珠分离法抗原肽-MHC分子四聚体技术花环沉降法第6页，共30页，星期日，2025年，2月5日外周血单核细胞的分离离心前离心后稀释抗凝血淋巴细胞分离液血浆单个核细胞粒细胞红细胞密度梯度离心法第7页，共30页，星期日，2025年，2月5日淋巴细胞及其亚群的分离第8页，共30页，星期日，2025年，2月5日抗原肽-MHC分子四聚体技术

T第9页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠的抓取和固定通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，翻转后将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。第10页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠的抓取和固定第11页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠的抓取和固定第12页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠的处死方法颈椎脱臼法：用拇指和食指用力往下按住鼠头，另一只手抓住鼠尾，用力稍向后上方一拉，使之颈椎脱臼，造成脊髓与脑髓断离，动物立即死亡。第13页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠的处死法（颈椎脱臼法）

第14页，共30页，星期日，2025年，2月5日倒T字开腹

第15页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠脾脏第16页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠脾脏第17页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠脾脏第18页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠胸腺第19页，共30页，星期日，2025年，2月5日小白鼠胸腺第20页，共30页，星期日，2025年，2月5日【实验器材】

小白鼠手术器械，解剖台,血细胞计数板,显微镜0.2％的台盼蓝染液第21页，共30页，星期日，2025年，2月5日【实验步骤】颈椎脱臼法处死小白鼠，取其脾脏将脾脏放入适量（约15ml）生理盐水中，除去筋膜取绿豆大小的脾脏，用玻片研磨制成10ml细胞悬液取１ml细胞悬液于试管中，加入１滴台盼蓝染液混匀后静置3分钟，低倍镜观察第22页，共30页，星期日，2025年，2月5日【台盼兰拒染法原理】

通透性着色颜色体积死细胞高易蓝大活细胞低难无色小活细胞死细胞第23页，共30页，星期日，2025年，2月5日注意事项脾脏去净筋膜，弃边缘，取其中间部分研磨时不可用力过大，时间不宜过长染色时间不宜过长或过短血细胞计数板的使用方法（10倍镜、暗视野）第24页，共30页，星期日，2025年，2月5日血细胞记数板

细胞计数池第25页，共30页，星期日，2025年，2月5日血细胞计数池的构造

白细胞计数区：红细胞计数区：无效计数区第26页，共30页，星期日，2025年，2月5日【计数原则】

1、2、“”形随机计数S计左不计右，计上不计下√×√√第27页，共30页，星期日，2025年，2月5日【实验结果】

第28页，共30页，星期日，2025年，2月5日实验操作录像第29页，共30页，星期日，2025年，2月5日DepartmentofImmunology胸腺哺乳动物的中枢免疫器官，是T细胞分化、发育的场所，其髓质中含成熟的T细胞和巨噬细胞，皮质中富含不成熟T细胞，在胸腺微环境中，未成熟T细胞经历复杂的选择过程而发育为成熟的T细胞胸腺的结构表面有结缔组织被膜，结缔组织伸入胸腺实质把胸腺分成许多不完全分隔的小叶。小叶周边为皮质，深部为髓质。淋巴结表面有薄层被膜，数条输入淋巴管（afferentlymphaticvessel）穿过被膜通入被膜下淋巴窦。被膜结缔组织伸入实质形成小梁（trabecula）。淋巴结的一侧凹陷称为门部（hilus）此处有较疏松的结缔组织伸入淋巴结内，血管、神经和输出淋巴管（efferentlymphaticv