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2025年病理科三基培训、组织切片及切片制备培训考核及答案

2025年病理科三基培训重点围绕基础理论、基本知识、基本技能展开，结合组织切片及切片制备全流程操作规范，强化从业人员对病理诊断前处理环节的精准把控能力。以下为具体培训内容、考核方案及配套试题与答案。

一、培训核心内容

（一）基础理论

1.组织学与病理学基础

需掌握人体各系统正常组织学结构特点（如肝脏的肝小叶结构、肾脏的肾单位组成）、常见病变的组织学改变（如炎症的渗出、变性与坏死的形态差异），以及不同组织对固定液的敏感性（如淋巴组织易自溶需快速固定，神经组织需避免过度脱水）。

2.病理技术原理

重点理解组织固定的化学机制（如甲醛与蛋白质的交联反应、乙醇的凝固蛋白作用）、脱水与透明的溶剂置换原理（乙醇通过逐级浓度置换组织内水分，二甲苯通过与乙醇互溶实现透明）、包埋时石蜡与组织的相容性（石蜡熔点需与组织硬度匹配，常规用56-58℃石蜡，脂肪组织用52-54℃软蜡）。

（二）基本知识

1.试剂与设备

-固定液配制：10%中性福尔马林（4%甲醛）需用磷酸缓冲液调节pH至7.2-7.4，避免酸性环境导致组织收缩、核深染；Bouin液（苦味酸-甲醛-冰醋酸混合液）适用于胚胎组织，可较好保存糖原。

-脱水剂选择：常规使用梯度乙醇（70%→80%→95%→100%），每级时间60-90分钟（大标本延长至2小时），注意100%乙醇需定期更换，避免水分残留影响透明效果。

-设备操作：轮转式切片机需定期校准刀架角度（常规组织3-5°，骨组织或硬组织1-2°），切片刀需每200-300张更换一次刃口；摊片机水温控制在40-45℃（神经组织38-40℃防皱缩，胃肠组织42-45℃防卷曲）。

2.质量控制要点

-取材规范：标本需修切平整（厚度≤3mm），避免折叠；空腔组织（如胃、肠）需沿长轴剪开平铺固定；骨组织需脱钙完全（用10%硝酸脱钙，检测方法：针刺无阻力或X线显影密度均匀）。

-包埋技巧：组织面需与蜡块底面垂直，避免切片时倾斜；脂肪组织需用镊子轻压展平，防止包埋后收缩；多块组织包埋时间距≥2mm，避免切片重叠。

（三）基本技能

1.组织处理流程

固定（10%中性福尔马林，常规组织6-24小时，大标本48小时以上）→水洗（流水冲洗2小时去除残留固定液）→脱水（梯度乙醇，每级时间依梯度递增）→透明（二甲苯2级，每级30-60分钟，至组织呈半透明）→浸蜡（2级纯蜡，60℃恒温，每级60-90分钟）→包埋（石蜡温度58-60℃，组织定位后冰水浴快速凝固）。

2.切片与染色操作

-切片：调整切片机厚度至3-5μm（淋巴结3-4μm，肝脏4-5μm），持刀角度15-20°，匀速推进；修块时先切去表面蜡层，再切出完整组织面。

-展片与捞片：摊片机水温42℃，将切片轻放水面，用载玻片从下方托住，避免气泡；捞片后60℃烤片1小时（神经组织45℃烤片2小时防脱片）。

-HE染色：切片脱蜡至水（二甲苯2级各5分钟→100%乙醇2级各3分钟→95%乙醇2分钟→85%乙醇1分钟→蒸馏水1分钟）→苏木精染色5-8分钟→自来水洗→1%盐酸酒精分化3-5秒→自来水洗→温水蓝化5分钟→伊红染色30秒-2分钟→梯度乙醇脱水（85%→95%→100%各1分钟）→二甲苯透明2级各3分钟→中性树胶封片。

二、培训考核方案

（一）考核形式

采用“理论考试（60%）+操作考核（40%）”综合评分制，总分≥85分为合格。

（二）理论考试内容

1.选择题（30题，每题2分）

涵盖固定液选择（如“脑标本首选固定液是？A.10%福尔马林B.Bouin液C.乙醇D.戊二醛”）、脱水时间计算（如“5mm厚的肝脏标本，70%乙醇脱水时间应为？A.30分钟B.60分钟C.90分钟D.120分钟”）、切片厚度标准（如“淋巴结切片理想厚度是？A.2-3μmB.3-4μmC.4-5μmD.5-6μm”）等。

2.简答题（5题，每题6分）

包括“简述HE染色中盐酸酒精的作用及操作要点”“列举3种切片出现刀痕的可能原因”“说明包埋时组织定位错误对诊断的影响”等。

3.案例分析题（1题，20分）

给出具体场景（如“某胃腺癌标本切片出现组织发脆、碎裂，可能的技术环节问题有哪些？应如何改进？”），要求分析原因并提出解决方案。

（三）操作考核内容

1.取材与包埋（15分）

评分标准：标本修切厚度≤3mm（5分）、组织定位正确（5分）、蜡块边缘整齐无气泡（5分）。

2.切片与展片（20分）

评分标准：切片厚度3-5μm（5分）、无刀痕/