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演讲人：
日期:
病理科肺癌组织病理切片解读
CATALOGUE
目录
01
肺癌组织病理学基础
02
切片标本处理流程
03
组织学特征分析方法
04
诊断标准与验证
05
常见挑战与解决方案
06
报告与临床应用
01
肺癌组织病理学基础
肺癌分类与亚型
小细胞肺癌（SCLC）
具有高度侵袭性，细胞体积小、胞质稀少，核染色质呈细颗粒状，常见神经内分泌标志物（如Syn、CgA）阳性表达，临床进展快且易早期转移。
其他罕见亚型
如肉瘤样癌（含梭形或巨细胞成分）、类癌（低级别神经内分泌肿瘤，染色质呈盐胡椒样）及腺鳞癌（同时表达腺癌和鳞癌标志物），需通过免疫组化及分子检测进一步鉴别。
非小细胞肺癌（NSCLC）
占肺癌的80%以上，包括腺癌（腺泡状、乳头状或微乳头结构，TTF-1/NapsinA阳性）、鳞癌（角化珠或细胞间桥，p40/p63阳性）和大细胞癌（缺乏分化特征，需排除其他亚型）。
标本固定与处理
手术切除或活检组织需立即用10%中性福尔马林固定（体积比1:10），固定时间6-48小时以确保细胞形态保存，避免过度固定导致抗原丢失。
组织切片制备原理
石蜡包埋技术
脱水梯度乙醇（70%-100%）处理后，二甲苯透明，浸蜡（56-58℃石蜡）4小时以上，包埋时需注意组织定向（如支气管切面需垂直包埋）。
切片与染色标准
采用轮转式切片机切取4μm薄片，HE染色需核质对比清晰（苏木精染核5分钟，伊红染胞质30秒），特殊染色（如弹力纤维染色）需根据诊断需求选择。
解读前准备要求
临床信息整合
需收集患者年龄、吸烟史、影像学特征（如肿块位置、毛刺征）及血清肿瘤标志物（CEA、CYFRA21-1等），这些信息对鉴别转移癌与原发性肺癌至关重要。
辅助技术准备
提前确认免疫组化抗体（如PD-L122C3/SP142）有效性，分子检测样本需满足肿瘤细胞含量＞20%（NGS检测要求＞10%），避免假阴性结果。
切片质量评估
检查切片是否存在刀痕、折叠或染色不均，确保关键区域（如肿瘤-正常组织交界处）完整，必要时要求重新切片或补充免疫组化。
02
切片标本处理流程
标本固定与保存步骤
采用10%中性缓冲福尔马林溶液固定组织，确保渗透均匀，避免组织收缩或变形，固定时间需根据组织厚度精确控制。
中性缓冲福尔马林固定
固定后标本需置于4℃环境中暂存，转运时使用密封防漏容器，避免冻融或干燥导致组织降解。
低温保存与转运
固定完成后需用磷酸盐缓冲液冲洗残留固定剂，并对组织进行标准化修整，确保后续切片方向准确。
固定后冲洗与修整
01
02
03
切片制作关键技术
石蜡包埋质量控制
脱水、透明、浸蜡过程需严格控制试剂浓度和时间，包埋时调整组织方位，确保切片完整性。
切片厚度与平整度
切片贴附前需涂覆多聚赖氨酸或APES胶，高温烘烤增强附着力，减少染色过程中脱片风险。
使用旋转式切片机将组织切成4μm薄片，刀片角度和速度需优化，避免皱褶或划痕影响诊断。
防脱片处理技术
苏木精-伊红染色为肺癌诊断基础，可清晰显示细胞形态、核分裂象及间质特征，适用于初筛。
常规HE染色适用性
针对疑难病例选用PAS染色检测黏液、Masson三色染色观察纤维化，或银染突出神经内分泌分化。
特殊染色辅助鉴别
根据形态学疑点选择TTF-1、NapsinA（腺癌）、p40（鳞癌）等抗体组合，提高分型准确性。
免疫组化标记组合
染色方法选择标准
03
组织学特征分析方法
癌细胞形态识别要点
核异型性观察
癌细胞核常表现为大小不一、形态不规则，核染色质增粗且分布不均，核仁明显增大或增多，核膜增厚且轮廓不清晰。
02
04
03
01
核分裂象计数
高倍镜下统计核分裂象数量，异常活跃的核分裂活动（如每10个高倍视野超过5个）提示肿瘤恶性程度较高。
胞质特征分析
癌细胞胞质可能呈现嗜碱性或嗜酸性增强，部分腺癌可见黏液空泡，鳞癌则可能出现角化珠或胞质内角化物质沉积。
细胞排列方式
癌细胞可呈巢状、腺管状或弥漫性分布，腺癌常见腺腔结构，小细胞癌则表现为燕麦样细胞密集排列。
间质与血管反应评估
评估淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等浸润情况，大量淋巴细胞浸润可能预示较好的免疫应答和预后。
炎性细胞浸润类型
血管生成现象
坏死区域判定
肿瘤间质常伴随胶原纤维增生，纤维化程度与肿瘤侵袭性相关，致密纤维化可能限制肿瘤扩散但提示慢性炎症反应。
新生血管密度增加是恶性肿瘤特征，需注意血管形态异常（如迂曲、管壁不完整）及肿瘤细胞是否侵入血管腔。
肿瘤中心坏死常见于快速生长的恶性肿瘤，需区分凝固性坏死与液化性坏死，并记录坏死范围占比。
间质纤维化程度
正常组织对比策略
支气管黏膜对照
对比癌旁正常支气管黏膜的假复层纤毛柱状上皮结构，观察癌细胞是否突破基底膜或取代正常上皮。
肺泡结构保留性
腺癌中需判断肿瘤是否保留
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