实验室样本采集处理保存方式.docxVIP

实验室样本采集处理保存方式

一、实验室样本采集处理保存概述

在实验室研究中，样本的采集、处理和保存是确保实验结果准确性和可靠性的关键环节。规范的样本管理流程能够有效减少样本污染、降解或丢失的风险，从而保障实验数据的真实性。本指南旨在提供一套系统化的样本采集、处理和保存方法，以适应不同类型样本的需求。

二、样本采集的基本原则

（一）标准化操作

1.严格遵守标准操作规程（SOP），确保每一步操作的一致性。

2.使用经过验证的采集工具和容器，避免交叉污染。

3.记录详细的采集信息，包括时间、地点、操作人员等。

（二）个体化需求

1.根据样本类型（如血液、尿液、组织等）选择合适的采集方法。

2.考虑样本用途（如检测、测序、培养等）确定采集量。

3.针对特殊样本（如易降解物质）采取保护性措施。

（三）安全防护

1.操作前进行手卫生和必要的个人防护（如手套、口罩）。

2.使用一次性采血管和注射器减少污染风险。

3.处理生物危险样本时遵循生物安全等级要求。

三、样本采集操作流程

（一）血液样本采集

1.准备工作：

(1)检查采血管是否完好，确认采血管类型（如EDTA、肝素等）。

(2)准备消毒用品（75%酒精、无菌棉签）和急救用品。

(3)核对受采者身份信息（姓名、出生日期等）。

2.采集步骤：

(1)用酒精棉签消毒采血部位（通常为肘正中静脉）。

(2)待消毒液自然晾干后，以15-30度角进针。

(3)根据需要采集的血量选择合适的采血管数量。

(4)采集完成后缓慢拔针，用棉签按压止血。

3.标记与转运：

(1)立即标记采血管标签，包括样本编号、采集时间等。

(2)在室温下（通常18-25℃）转运至实验室，避免剧烈震荡。

（二）组织样本采集

1.准备工作：

(1)确认手术计划，准备活检针或组织钳。

(2)准备10%中性甲醛溶液或RNALater固定液。

(3)准备冰盒和预冷的RNA提取试剂（如需）。

2.采集步骤：

(1)局部麻醉后，使用活检针获取直径2-3mm的组织样本。

(2)立即将组织放入固定液中，确保完全浸没。

(3)标记固定液瓶，记录采集部位和病理信息。

3.处理要求：

(1)固定时间通常为24小时，避免超过48小时。

(2)对于RNA样本需立即添加RNA保护剂。

(3)使用冰袋保持样本低温，避免降解。

（三）尿液样本采集

1.准备工作：

(1)提前告知受采者采集要求（如晨尿、中段尿）。

(2)准备无菌尿杯和防腐剂（如需）。

(3)准备消毒湿巾和防水标签。

2.采集步骤：

(1)用消毒湿巾清洁尿道口周围。

(2)嘱受采者排尿，用尿杯接取中段尿液。

(3)立即盖好杯盖，避免污染。

3.处理要求：

(1)采集后应在2小时内处理或冷藏保存。

(2)如需检测特定指标，可添加相应防腐剂。

(3)记录样本颜色、气味等初步观察结果。

四、样本处理方法

（一）血液样本处理

1.离心分离：

(1)将采血管水平放置5分钟后低速离心（1000-3000rpm）。

(2)分离血浆、血细胞和血清，转移至不同管中。

2.浓缩处理：

(1)对于RNA提取，使用柱式纯化法去除抑制剂。

(2)对于蛋白质分析，可通过超滤浓缩样本。

（二）组织样本处理

1.石蜡包埋：

(1)将组织修块至2mm3大小，放入组织盒。

(2)缓慢注入石蜡，确保组织完全包埋。

2.冷冻切片：

(1)将组织置于-80℃冷冻，制备冰冻切片。

(2)使用预冷载玻片，避免组织融解。

（三）尿液样本处理

1.沉淀去除：

(1)4000rpm离心5分钟，收集上清液。

(2)对于化学分析，可直接使用上清液。

2.提取处理：

(1)加入有机溶剂（如甲醇）提取小分子物质。

(2)使用固相萃取柱纯化目标化合物。

五、样本保存规范

（一）短期保存（1周内）

1.血液样本：

(1)血浆：-20℃冷冻，建议分装减少反复冻融。

(2)血细胞：-80℃保存，用于流式细胞分析。

2.组织样本：

(1)未固定组织：-80℃冻存，用于原位杂交。

(2)石蜡样本：4℃保存，用于常规病理检测。

3.尿液样本：

(1)未处理样本：-20℃冷冻，用于代谢组学。

(2)提取物：-80℃保存，避免降解。

（二）长期保存（1年以上）

1.血液样本：

(1)全血：-80℃深低温冷冻，可保存5年以上。

(2)分离组分：真空冻存，减少冰晶损伤。

2.组织样本：

(1)RNA样本：液氮罐保存，使用RNA保护剂。

(2)蛋白质样本：乙腈沉淀后-80℃保存。

3.尿液样本：

(1)干燥尿液：真空冷冻干燥，用于非靶标分析。

(2)提取物：加入乙腈后-80℃保存。

六、样本质量控制

（一）外观检查