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实验动物学样本采集操作规程

###概述

实验动物学样本采集是研究动物生理、病理、遗传、药理等过程中不可或缺的环节。规范的样本采集操作规程不仅能保证实验结果的准确性，还能最大限度地减少对动物的应激反应和损伤。本规程旨在提供一套标准化、系统化的样本采集方法，涵盖样本类型、采集步骤、注意事项及质量控制等方面，确保实验过程的科学性和安全性。

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###一、样本类型及适用范围

实验动物样本采集的种类多样，主要包括以下几类：

（一）血液样本

1.**用途**：用于血常规、生化指标、免疫学检测等。

2.**适用动物**：啮齿类、兔、犬等。

3.**采集方法**：股动脉、颈静脉或心脏采血。

（二）组织样本

1.**用途**：用于病理学分析、基因表达研究等。

2.**适用动物**：各类实验动物。

3.**采集方法**：手术切除、活检或尸体解剖取材。

（三）尿液样本

1.**用途**：用于肾功能、代谢及药物排泄研究。

2.**适用动物**：各类实验动物。

3.**采集方法**：导尿管插入、代谢笼收集或自然排尿收集。

（四）粪便样本

1.**用途**：用于肠道菌群分析、毒理学研究等。

2.**适用动物**：各类实验动物。

3.**采集方法**：直接收集或代谢笼收集。

（五）脑脊液样本

1.**用途**：用于神经系统疾病研究。

2.**适用动物**：兔、犬等。

3.**采集方法**：腰穿或脑室穿刺。

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###二、样本采集步骤

####（一）准备工作

1.**环境准备**：选择清洁、通风的实验操作台，使用无菌操作区域。

2.**器械准备**：

-无菌采血管、注射器、手术刀、止血钳、组织固定液（如10%中性甲醛）。

-个人防护用品：手套、护目镜、实验服。

3.**动物麻醉**：根据采集部位和动物种类选择合适的麻醉方式（如戊巴比妥、异氟烷），确保动物处于无痛状态。

####（二）血液样本采集

1.**股动脉采血（兔、犬）**：

(1)剃毛消毒，暴露股动脉。

(2)用1mL注射器缓慢抽取血液，避免空气进入。

(3)立即注入抗凝管（如肝素管）或血清管。

(4)轻柔按压止血，观察动物恢复情况。

2.**颈静脉采血（啮齿类）**：

(1)固定动物头部，暴露颈静脉。

(2)用微量移液器或注射器采血，避免损伤血管。

(3)采血后用止血海绵按压。

####（三）组织样本采集

1.**手术取材**：

(1)常规消毒皮肤，铺无菌巾。

(2)用手术刀沿组织边缘切开，完整切除目标组织。

(3)立即放入4℃生理盐水或固定液中，标记样本编号。

2.**活检取材（如肝脏）**：

(1)暴露目标器官，用活检针穿刺取组织。

(2)取出组织后立即固定，记录采集时间。

####（四）尿液样本采集

1.**导尿管插入（犬、兔）**：

(1)消毒尿道口，插入导尿管，缓慢抽取尿液。

(2)收集5-10mL尿液于无菌离心管中。

2.**代谢笼收集（啮齿类）**：

(1)将动物置于代谢笼中，收集24小时尿液。

(2)去除粪便后保存于-80℃冰箱。

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###三、注意事项及质量控制

####（一）动物福利

1.严格控制麻醉剂量，避免过量致死。

2.术后观察动物恢复情况，必要时进行保温或补液。

####（二）样本保存

1.血液样本：抗凝管需混匀，4℃离心后分离血浆；血清管需静置30分钟，避免溶血。

2.组织样本：固定液需足量，确保组织完全浸没，标记清晰。

3.尿液样本：尽快离心或过滤，去除杂质，避免细菌污染。

####（三）质量控制

1.每次采集前检查器械是否无菌，避免交叉污染。

2.记录样本编号、采集时间、动物信息，确保可追溯性。

3.定期检测样本质量（如血常规、生化指标），确保数据可靠性。

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###四、应急处理

1.**动物麻醉过量**：立即停止麻醉，进行人工呼吸或联系兽医抢救。

2.**器械污染**：发现污染立即更换，并用75%酒精消毒操作区域。

3.**样本破损**：及时补充固定液，重新固定或废弃样本。

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###五、总结

规范的样本采集操作规程是实验动物学研究的基础。通过科学的准备、标准化的步骤及严格的质量控制，可以有效提升实验数据的准确性和可靠性，同时保障动物福利。实验人员需定期培训，熟悉各类样本采集技术，确保操作符合伦理及科学要求。

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###三、注意事项及质量控制（续）

####（一）动物福利（续）

1.**严格控制麻醉剂量，避免过量致死**：

(1)根据动物种类（如啮齿类、兔、犬）、体重及采集部位，精确计算麻醉药物（如戊巴比妥钠、异氟烷等）的剂量。参考药物说明书或实验动物学相关文献中的推荐剂量范围，通常以mg/kg体重