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林木转基因RNA干扰效率试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.RNA干扰主要作用于（）

A.DNAB.mRNAC.tRNAD.rRNA

2.以下哪种是常用的RNA干扰载体（）

A.质粒载体B.噬菌体载体C.病毒载体D.人工染色体载体

3.决定RNA干扰特异性的是（）

A.siRNAB.miRNAC.lncRNAD.circRNA

4.RNA干扰技术能实现（）

A.基因敲除B.基因过表达C.基因沉默D.基因突变

5.导入细胞内引发RNA干扰的是（）

A.单链RNAB.双链RNAC.环状RNAD.线性RNA

6.以下对RNA干扰效率影响较小的是（）

A.细胞类型B.温度C.载体浓度D.实验日期

7.与RNA干扰相关的核酸酶是（）

A.蛋白酶KB.核酸内切酶C.Dicer酶D.碱性磷酸酶

8.检测RNA干扰效率常用的方法是（）

A.WesternblotB.ELISAC.PCRD.凝胶成像

9.提高RNA干扰效率的措施不包括（）

A.优化载体设计B.增加siRNA浓度C.更换细胞系D.降低培养湿度

10.RNA干扰现象最早在（）中被发现。

A.线虫B.果蝇C.小鼠D.人类细胞

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.影响林木转基因RNA干扰效率的因素有（）

A.载体类型B.导入方法C.林木品种D.环境条件

2.常用的RNA干扰导入方法有（）

A.电穿孔法B.脂质体转染法C.农杆菌介导法D.显微注射法

3.以下哪些属于RNA干扰相关分子（）

A.siRNAB.miRNAC.AGO蛋白D.RISC复合物

4.检测RNA干扰效率可从哪些水平进行（）

A.DNA水平B.mRNA水平C.蛋白质水平D.代谢产物水平

5.优化RNA干扰载体设计可从哪些方面入手（）

A.启动子选择B.终止子选择C.标记基因选择D.多克隆位点设计

6.以下哪些是RNA干扰技术的应用（）

A.基因功能研究B.抗病育种C.提高木材品质D.改善植物观赏性

7.不同细胞对RNA干扰效率的影响可能源于（）

A.细胞代谢活性B.细胞内核酸酶活性C.细胞膜通透性D.细胞分化程度

8.以下关于RNA干扰的特点有（）

A.特异性B.高效性C.可遗传性D.稳定性

9.提高RNA干扰效率的策略包括（）

A.优化siRNA序列B.联合使用多种导入方法C.选择合适的培养条件D.多次转染

10.与RNA干扰相关的生物学过程有（）

A.转录后调控B.抗病毒防御C.发育调控D.细胞凋亡

三、判断题（每题2分，共10题）

1.RNA干扰只能在动物细胞中发生。（）

2.只要导入siRNA就能高效引发RNA干扰。（）

3.不同林木品种对RNA干扰效率无差异。（）

4.温度不会影响RNA干扰效率。（）

5.检测RNA干扰效率只能通过检测mRNA水平。（）

6.载体的选择对RNA干扰效率至关重要。（）

7.RNA干扰技术可实现基因的完全敲除。（）

8.增加siRNA浓度一定能提高RNA干扰效率。（）

9.所有细胞对RNA干扰的响应是相同的。（）

10.RNA干扰与植物的抗病毒能力有关。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述RNA干扰的基本原理。

答案：外源双链RNA进入细胞后被Dicer酶切割成siRNA，siRNA与AGO等蛋白形成RISC复合物，RISC复合物识别并结合与其互补的mRNA，进而将其降解，实现基因沉默。

2.列举三种检测RNA干扰效率的方法及原理。

答案：①qRT-PCR：通过检测mRNA水平变化，依据荧光信号定量mRNA含量。②Westernblot：利用抗体与蛋白特异性结合，经显色反映蛋白表达量。③荧光定量检测：导入带荧光标记基因载体，根据荧光强度判断干扰效率。

3.简述优化RNA干扰载体设计的要点。

答案：选择强启动子保证高效转录，合适终止