林木转基因表达Western blot试题库及答案.docVIP

林木转基因表达Westernblot试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.Westernblot检测的是？

A.DNAB.RNAC.蛋白质D.多糖答案：C

2.进行Westernblot时，封闭的目的是？

A.固定蛋白B.防止非特异性结合C.标记蛋白D.清洗杂蛋白答案：B

3.常用的Westernblot显色底物是？

A.溴酚蓝B.二氨基联苯胺（DAB）C.考马斯亮蓝D.伊红答案：B

4.Westernblot转膜一般用的是？

A.硝酸纤维素膜B.琼脂糖凝胶C.聚丙烯酰胺凝胶D.葡聚糖凝胶答案：A

5.一抗的作用是？

A.结合目的蛋白B.结合二抗C.标记蛋白D.清洗膜答案：A

6.二抗通常带有？

A.放射性标记B.荧光或酶标记C.生物素标记D.地高辛标记答案：B

7.Westernblot中SDS的作用是？

A.使蛋白质变性B.分离蛋白C.染色蛋白D.固定蛋白答案：A

8.检测转基因林木中目的蛋白表达，首先要？

A.提取蛋白B.提取RNAC.提取DNAD.做PCR答案：A

9.转膜时电流一般控制在？

A.1-2AB.1-2mAC.10-20AD.10-20mA答案：D

10.Westernblot中预染Marker的作用是？

A.指示蛋白条带位置B.标记目的蛋白C.检测转膜效率D.A和C答案：D

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.Westernblot实验所需的试剂有？

A.一抗B.二抗C.封闭液D.显色液答案：ABCD

2.影响Westernblot结果的因素有？

A.蛋白上样量B.抗体浓度C.转膜时间D.显色时间答案：ABCD

3.以下可用于蛋白提取的方法有？

A.超声破碎法B.研磨法C.化学裂解法D.离心法答案：ABC

4.选择二抗时需要考虑的因素有？

A.一抗的种属来源B.检测方法C.二抗的亲和力D.二抗的价格答案：ABC

5.Westernblot转膜过程中可能出现的问题有？

A.转膜不完全B.膜干了C.蛋白条带变形D.电流过大答案：ABCD

6.封闭液可以是？

A.脱脂奶粉溶液B.BSA溶液C.明胶溶液D.蔗糖溶液答案：ABC

7.蛋白样品处理过程中可能用到的试剂有？

A.SDSB.蛋白酶抑制剂C.尿素D.甘油答案：ABCD

8.进行Westernblot实验时，实验器材包括？

A.电泳仪B.转膜仪C.摇床D.成像系统答案：ABCD

9.显色方法有？

A.化学发光法B.荧光显色法C.比色法D.放射性显色法答案：ABC

10.优化Westernblot实验的措施有？

A.优化抗体浓度B.调整转膜条件C.更换显色底物D.改进蛋白提取方法答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.Westernblot只能检测一种蛋白。（×）

2.一抗和二抗的结合是特异性的。（√）

3.转膜时间越长越好。（×）

4.封闭时间对结果无影响。（×）

5.蛋白提取过程要防止蛋白降解。（√）

6.不同来源的一抗使用浓度相同。（×）

7.显色完成后可以长时间保存膜。（×）

8.Westernblot可用于检测蛋白的表达量变化。（√）

9.实验中Marker可以不用。（×）

10.二抗的质量不影响实验结果。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述Westernblot基本原理。

答案：通过SDS-PAGE分离蛋白质，转膜至固相膜上，用封闭液封闭，依次与一抗、二抗结合，二抗带有标记，利用相应显色底物显色来检测目的蛋白。

2.蛋白提取过程中为什么要加蛋白酶抑制剂？

答案：防止细胞内蛋白酶对目的蛋白的降解，保证提取的蛋白完整性，从而准确检测其表达情况。

3.转膜过程中如何确保转膜效果？

答案：选择合适的转膜设备和参数，如电流、时间；保证膜与凝胶紧密贴合，防止有气泡；控制转膜环境温度。

4.封闭的重要性是什么？

答案：封闭可填充膜上未结合蛋白的空白位点，防止后续一抗、二抗等非特异性结合在膜上，减少背景干扰，提高检测特