《兽药中非法添加药物快速筛查法（液相色谱—二极管阵列法）》.pdfVIP

附件1

兽药中非法添加药物快速筛查法

（液相色谱—二极管阵列法）

1适用范围

1.1本方法适用于兽药中紫外光谱图库中所列非法添加药物的筛查。

1.2用于紫外光谱图库之外的具有紫外吸收的非法添加药物的筛查时，需进行空

白试验和检测限测定，并测定对照品溶液的紫外光谱图。

2检查方法

按照高效液相色谱法（《中国兽药典》一部附录0512）测定。

2.1—

超高效液相色谱二极管阵列法

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（ACQUITY

UPLCHSST1.8µm2.1×100mm-1mol/L77g

3，，）；以水醋酸铵溶液（取醋酸铵，加水

1000mlpH5.0991A-1mol/L

至，用冰醋酸调节值至）（∶）为流动相，甲醇醋酸铵溶

991B0.45ml

液（∶）为流动相，按下表进行线性梯度洗脱；流速每分钟；二极管阵

列检测器，采集波长范围为200nm~400nm，分辨率为1.2nm，提取波长按需设定（如

230nm、270nm、最大值图等）。

A%B%

时间（分钟）流动相（）流动相（）

0.00982

0.25982

12.25199

13.00199

13.01982

17.00982

供试品溶液的配制中药固体制剂取50mg，加50%甲醇溶液10ml，超声10

分钟（必要时可调整）；

中药液体制剂取10µl~20µl，加50%甲醇溶液10ml，摇匀；

化药液体制剂取20µl，加50%甲醇溶液10ml，摇匀；

50mg50%10ml10

其他化药制剂取，加甲醇溶液，超声分钟（必要时可调整），

—2—

用50%甲醇溶液稀释制成每1ml中约含有效成分50µg~100µg的溶液。

50%

对照品溶液的配制（紫外光谱图库外品种）取对照品适量，用甲醇溶液溶

解并稀释制成每1ml中约含50µg~100µg的溶液，溶解性差的对照品，可加适量盐酸

溶液或氢氧化钾溶液使其溶解。

2µl

测定法取供试品溶液，注入液相色谱仪，同时记录色谱图与光谱图。通过

与紫外光谱图库中对照光谱图最大吸收波长和图形比对，确定供试品中是否含有相应

药物。可根据实验结果调整进样量或浓度，使紫外光谱图光滑、特征清晰。

结果判定供试品溶液光谱图与紫外光谱图库中对应光谱图无明显差异，判为可

疑阳性结果。筛查结果呈可疑阳性的样品，需按农业农村部发布的兽药质量监