细胞治疗实验室基本工艺作业流程.docVIP

细胞诊疗试验室工艺步骤

细胞诊疗试验室工艺步骤按种类分为：

一、试剂耗材入库统计，试剂耗材使用统计，试剂配制统计，配制试剂使用统计。

入库需要统计产品名称、批号、使用期、数量、存放位置、入库时间。

试剂耗材使用统计包含名称、批号、用途，时间。

试剂配制统计包含原料名称、批号，配制试剂时间、使用期、批号。

配制试剂使用统计包含使用时间、批号、用途。

二、试验统计，包含采血、分血、细胞接种、补液、质检、回输。

采血有2个信息试验室需要统计，包含浓缩白细胞体积和血浆体积。

分血有需要统计使用分离液量和单个核细胞数量。

细胞接种需要统计DC、CIK、CD3AK、γδT、NK等细胞接种数量、培养基体积、细胞因子添加量。

补液需要统计补液时间和体积。

质检需要做细菌真菌培养、内毒素检测、革兰氏检测，统计做这些质检时间。

回输需要统计回输细胞种类、时间、细胞体积、细胞数量。

三、细胞检测统计，包含细菌真菌培养，内毒素检测，革兰氏检测，流式检测。

统计内容包含样品起源、检测时间、结果、检测人。

四、清洗消毒统计。

包含清洗消毒时间、方法、消毒使用期。

细胞培养步骤图

采血

采血

分血

DC细胞

CIK细胞

CD3AK细胞

γδT细胞

NK细胞

其它细胞

细胞计数

细胞接种

2小时后洗版

第5天加成熟剂1

第6天加成熟剂2

第7天收细胞，计算细胞存活率、细胞数后冻存或回输

第2天加CIK混合因子

依据细胞生长情况补液

回输前3天细菌真菌培养

回输前12小时革兰氏染色

计算细胞存活率、细胞数后给病人回输

依据细胞生长情况补液

回输前3天细菌真菌培养

回输前12小时革兰氏染色

依据细胞生长情况补液

回输前3天细菌真菌培养

回输前12小时革兰氏染色

依据细胞生长情况补液

回输前3天细菌真菌培养

回输前12小时革兰氏染色

计算细胞存活率、细胞数后给病人回输

计算细胞存活率、细胞数后给病人回输

计算细胞存活率、细胞数后给病人回输

NO：_

自体细胞制剂制备统计

患者基础情况

采血日期：

姓名

年龄

性别

科室

病案号

主管医生

床号

传染病

临床诊疗

病理切片

细胞制备标准操作统计

分血

数量

单位

日期

操作人

复核人

备注

自体血浆体积

ml

白细胞体积

ml

Ficol体积

ml

批号：

PBMC总量

×109

DC细胞制备

数量

单位

日期

操作人

复核人

备注

1、PBMC用量

×108

2、铺瓶（板）

瓶（板）

3、加DC培养液体积

ml

4、DC诱导因子（100X）

ml

批号：

5、第五天加DC成熟剂1（100X）

ml

批号：

6、第六天补加DC成熟剂2（100X）

ml

批号：

7、第七（八）天搜集DC

×107

CIK细胞制备

数量

单位

日期

操作人

复核人

备注

1、添加IFN-r

IU

2、PBMC用量

×108

3、接种体积

ml

4、添加CIK混合因子（100X）

ml

批号：

5、补液

第1次

ml

第2次

第3次

第4次

第5次

第6次

CD3AK细胞制备

数量

单位

日期

操作人

复核人

备注

1、添加CD3AK混合因子（100X）

ml

批号：

2、PBMC用量

×108

3、接种体积

ml

4、补液

第1次

ml

第2次

第3次

第4次

第5次

γδT细胞制备

数量

单位

日期

操作人

复核人

备注

1、PBMC用量

×109

2、接种体积

ml

3、添加γδT混合因子（100X）

ml

批号：

4、补液

第1次

ml

第2次

第3次

第4次

第5次

NK细胞制备

数量

单位

日期

操作人

复核人

备注

1、PBMC用量

×108

2、接种体积

ml

3、添加NK细胞混合因子（100X）

ml

批号：

4、补液

第1次

ml

第2次

第3次

第4次

第5次

细胞冻存及复苏标准操作统计

细胞冻存标准操作统计

日期

编号

细胞

类型

细胞

数量

冻存数量（支）

冻存液

编号

存放

位置

操作人

复核人

备注

细胞复苏标准操作统计

日期

编号

细胞

类型

细胞

数量

复苏数量（支）

复苏

用途

存放

位置

操作人

复核人

备注

自体细胞制剂回输统计

姓名

年龄

性别

科室

病案号

床号

次数

日期

细胞类型

批号

体积（ml）

回输方法

运输人

接收人

复核人

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

自体细胞制剂检控统计

次数

细胞

外观

细菌真菌

培养

革兰氏染色

细菌内毒素

最终检定结果

存活率

数量

操作人

复核人

回输细胞批号

均匀悬浊液，无异物

第一次回输前3天

每次回输当日

每次回输当日

需经检定合格后