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《食品毒理学》实验指导
实验一半衰期的测定•比色法测定水杨酸钠的血浆半衰期
实验二血液红胞、白胞计数
实验三四氯化碳对肝脏谷丙转氨酶G(PT)和谷草转氨酶G(OT)
的影响实验
*所需实验仪器:电子天平、pH计试(纸)、显微镜、分光光度计、灌胃针头、小()/
(大)离心机、注射器。
实验一半衰期的测定•比色法测定水杨酸钠的血浆半衰期
一、原理、目的
药物血浆半衰期2即血浆药物浓度下降一半所需的时间。绝大多数药物是按一级动力学规律消除(恒
比消除),因此每种药物都有固定的旧,不因血浆浓度高低而改变。本实验用分光光度法测定水杨酸钠的
血浆浓度并计算口小水杨酸钠为抗炎药,经肝代谢,在酸性环境中与.三氯化铁生成一种紫色的络合物,
在520nm波长下比色,其光密度与水杨酸浓度成正比。
通过测定水杨酸钠的血浆半衰期,使学生了解水杨酸钠在体内的消除速度,并掌握其血浆半衰期的
测定方法。半衰期是判断毒物蓄积程度的重要参数,对中毒和解毒有一定的实践意义。
二、试剂、器材及动物
离心管、试管、磅秤、玻璃棒、注射器、吸管、离心机、721型分光光度计;三氯醋酸、水杨酸钠、
三氯化铁:兔。
三、方法步骤
1、取离心管和试管各5支,分别标为1〜5号,备用。5支离心管各加入10%三氯醋酸7ml。
2、取兔1只,称体重,从耳静脉取血2ml置入1号离心管,用玻璃棒搅拌。然而自耳静脉注入10%
水杨酸钠(剂量为150mg/kg),并立即和60min后两次自另一耳静脉取血2mL分别注入2、3号离心管中,
搅拌。4、5号离心管分别加入蒸储水和0.02%水杨酸钠2ml。
3、取上述5支离心管进行离心(2000r/min,5min),准确吸取上清液6ml放入编号相对应的试管中,
分别滴入10%三氯化铁12滴(0.6ml)摇匀5min后比色。
4、用721型分光光度计520nm波长比色,以4号管调“0”,读得5号管光密度为x,再以1号管调
“0”,读得2号管为xi,3号管为X2,将上述操作归纳为下表:
水杨酸钠血浆半衰期的测定
试管名编号二氯醋酸兔血0.02%水杨酸钠水离心上清液三氯化铁
(ml)(ml)(ml)(ml)(ml)(git)
对照172————612
立即272——612
60min372————612
空白47————2612
标准57—2—612
5、计算半衰期
①求k值:k=y/x;y=0.02
②求水杨酸钠血浓度:给药后立即血浓度yi=kxi:给药后60min血浓度y2=kx。
③根据下列公式求半衰期:
0.301
tl/2=
0gyi-igy2)/t
四、结果
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