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种子生产与经营专业教学资源库《作物育种技术》----转基因方法的确定
熟悉载体介导转移系统的特点熟悉外源基因直接导入法的特点教学目标
种子生产与经营专业教学资源库选择适宜的遗传转化方法是提高遗传转化率的重要环节之一。尽管转基因的具体方法很多,但是概括起来说主要有两类:第一类是以载体为媒介的遗传转化第二类是外源目的DNA的直接转化
种子生产与经营专业教学资源库一、载体介导转移系统载体介导转移系统也称为间接转移系统法,是目前为止最常见的一类转基因方法。其基本原理是将外源基因重组进入适合的载体系统,通过载体携带将外源基因导入植物细胞,整合在核染色体组中并随着核染色体一起复制和表达。农杆菌Ti质粒或Ri质粒介导法是迄今为止植物基因工程中应用最多、机理最清楚、最理想的载体转移方法。
种子生产与经营专业教学资源库优点:受体种类多,可以在原生质体、单细胞和细胞团、组织器官或整株等多级水平上进行;方法成熟可靠,简便易行,周期短,转化率高。缺点:以转化双子叶植物为主,在大多数单子叶植物和裸子植物中的应用受限;转化体常出现“嵌合”现象,需在严格条件下加以选择来淘汰未转化细胞。一、载体介导转移系统
种子生产与经营专业教学资源库二、外源基因直接导入法外源基因直接导入技术是一种不需借助载体介导,直接利用理化因素进行外源遗传物质转移的方法,主要包括化学刺激法、基因枪轰击法等。优点:无宿主限制,适用于各种单、双子叶植物,操作简单。缺点:转化效率低,需要专门设备如电击仪、显微操作仪或基因枪,多数需要原生质体与愈伤组织,周期较长。
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