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课程名称:农产品质量检测技术授课教师:韩艳丽农药残留检测
原理快速检测仪法(定性)适用范围注意事项检验步骤仪器试剂
01原理酶抑制分光光度法依据GB/T5009.199-2003利用酶抑制原理和光电比色法原理研制而成。测定原理在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关关系。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应生成黄色物质,用分光光度计测定412nm下吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或安基甲酸酯类农药的存在。
02适用范围主要用于蔬菜、水果、茶叶、粮食、农副产品等食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测;此外还可用于果蔬茶生产基地和农贸批发销售市场现场检测,餐馆、学校、食堂、家庭果蔬加工前的安全速测等。
03仪器、试剂农药残留速测仪(配有以下仪器、试剂)常量天平恒温箱恒温水浴锅农残试剂缓冲液—提取显色剂—显色底物—乙酰胆碱酶—催化反应
04检测方法-比色法试剂配制与保存
04检测方法-比色法样品提取超声提取
04检测方法-比色法样品测定加2.5ml提取液加0.1毫升酶、显色显色10min加0.1ml底物转移到比色皿中加0.1ml酶,测抑制率
04检测方法-比色法结果判定抑制率≥50%阳性样品需重复测定2次以上抑制率50%阴性
04检测方法-比色法
04检测方法-速测卡法
05注意事项1234酶试剂及底物要在0-5℃条件下保存,但不能冻至结冰移液枪头要一一对应使用,不能混用,防止交叉污染从任何试剂瓶吸出的试剂,都不应该再次放回试剂瓶内韭菜、芹菜、蒜、葱、含叶绿素高的蔬菜,可采取整株提取液法
05注意事项胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化△C<0.3,才可往下操作若≥0.3,可能原因一是酶的活性不够,二是温度太低当吸光度大到无法读取时,说明测定液浑浊,有干扰说明
谢谢观看FoodSafetyTestingTechnology韩艳丽
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