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血细胞分类与分析技术详解
血液,作为人体生命活动的重要载体,其成分的细微变化往往是机体生理或病理状态的直接反映。血细胞分类与分析技术,作为临床检验医学的基石之一,通过对血液中各类细胞的数量、形态及比例进行精准检测,为疾病的诊断、治疗监测及预后评估提供了不可或缺的客观依据。本文将从血细胞的正常分类及其形态特征入手,系统阐述各类血细胞分析技术的原理、特点与应用,旨在为相关领域的从业者提供一份兼具专业性与实用性的参考。
一、血细胞的分类与正常形态特征
血液中的有形成分主要包括红细胞、白细胞和血小板三大类。其中白细胞根据其形态、细胞质内有无颗粒及颗粒的染色特性,又可进一步分为粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。粒细胞因胞质颗粒对不同染色剂的亲和力不同,再分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
(一)白细胞(Leukocyte,WBC)
白细胞是机体免疫系统的重要组成部分,在防御外来病原体入侵和清除体内异常细胞中发挥关键作用。
1.中性粒细胞(Neutrophil):最为常见的白细胞类型,胞体呈圆形,直径约七至十微米。细胞核形态多样,成熟者多为分叶状,一般为二至五叶,叶间以细丝相连,核染色质粗糙、致密,呈深紫红色。细胞质丰富,呈淡粉红色,内含有细小、均匀的淡紫红色中性颗粒。其主要功能为吞噬细菌和坏死组织。
2.嗜酸性粒细胞(Eosinophil):较中性粒细胞略大,直径约十至十五微米。细胞核多为两叶,呈“眼镜状”。细胞质内充满粗大、均匀、圆形的橘红色嗜酸性颗粒,折光性强。其与过敏反应及寄生虫感染密切相关。
3.嗜碱性粒细胞(Basophil):数量最少的白细胞,胞体大小与中性粒细胞相似或略小。细胞核形态不规则,呈分叶状、S形或不规则形,常因胞质颗粒遮盖而轮廓不清。细胞质内含有大小不等、分布不均的紫黑色嗜碱性颗粒,可覆盖于核上。其参与过敏反应及炎症过程,能释放肝素、组胺等生物活性物质。
4.淋巴细胞(Lymphocyte):大小差异较大,可分为小淋巴细胞(六至八微米)和大淋巴细胞(九至十六微米)。小淋巴细胞数量居多,核圆形或椭圆形,一侧常有小凹陷,核染色质极为致密,呈深紫红色,核仁不明显。细胞质极少,呈一窄缘围绕细胞核,染成淡蓝色,一般无颗粒。大淋巴细胞细胞质较丰富,可见少量粗大的嗜天青颗粒。淋巴细胞是特异性免疫的核心,T细胞参与细胞免疫,B细胞参与体液免疫。
5.单核细胞(Monocyte):体积最大的白细胞,直径约十二至二十微米。细胞核形态多样,可为圆形、椭圆形、肾形、马蹄形或不规则形,核染色质疏松、呈网状,着色较浅。细胞质丰富,呈灰蓝色或淡粉红色,内含细小的嗜天青颗粒,常有空泡。单核细胞在血液中短暂停留后,迁入组织分化为巨噬细胞,具有强大的吞噬能力。
(二)红细胞(Erythrocyte,RBC)
红细胞是血液中数量最多的细胞,主要功能是通过血红蛋白运输氧气和二氧化碳。正常成熟红细胞呈双面微凹的圆盘状,直径约七至八微米,边缘较厚,中心较薄,故在瑞氏染色涂片上呈中心淡染、周边较深的橘红色。无细胞核和细胞器,胞质内充满血红蛋白。这种形态使其具有较大的表面积,有利于气体交换。
(三)血小板(Platelet,PLT)
血小板并非严格意义上的细胞,而是由骨髓巨核细胞胞质脱落形成的胞质碎片。形态多样,多为圆形、椭圆形或不规则形,直径约二至四微米。在瑞氏染色下,血小板呈淡蓝色或淡紫红色,中央部分有细小的紫红色颗粒(颗粒区),周边部分为均质的浅蓝色(透明区)。血小板在生理性止血、凝血过程及维持血管内皮完整性方面至关重要。
二、血细胞分析技术的演进与详解
血细胞分析技术经历了从手工操作到自动化、智能化的飞跃,其精准度和效率不断提升,为临床提供了更丰富的诊断信息。
(一)手工显微镜检查法
这是最传统也是最基础的方法,至今仍是某些特殊情况(如异常细胞识别)的“金标准”。
1.原理与操作:采集外周血,制备良好的血涂片,经瑞氏-吉姆萨染色后,在光学显微镜下,人工观察细胞形态、进行分类计数并估算数量。红细胞和血小板的数量通常通过计数板在显微镜下直接计数。
2.优点:能够直接观察细胞形态,对异常细胞(如幼稚细胞、异型淋巴细胞、疟原虫等)的识别具有不可替代的优势;设备简单,成本低。
3.缺点:操作繁琐、耗时,受检验人员主观经验影响大,精密度和准确性相对较低,难以满足大样本量的检测需求。
(二)半自动血细胞分析仪
在手工法基础上引入部分自动化操作,如自动加样、稀释、混匀等,但仍需人工进行显微镜下分类或仪器仅能提供部分参数。是自动化分析的过渡阶段产品。
(三)全自动血细胞分析仪
目前临床实验室的主流设备,实现了血液细胞分析的全自动化和标准化。
1.电阻抗法(库尔特原理):这是最早应用于血细胞计数的自动化技术之一。其原理是基于血
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