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多重耐药菌主动筛查标准操作规程

一、筛查范围与对象

多重耐药菌（MDRO）主动筛查应覆盖以下高风险人群，以实现早期发现、精准防控：

（一）住院患者

1.入住重症医学科（ICU）、呼吸与危重症医学科、急诊重症监护室（EICU）、血液科、烧伤科等高风险科室的患者，入院24小时内完成首次筛查；

2.近3个月内有MDRO感染或定植史的患者，入院时及住院期间每7天重复筛查；

3.接受侵入性操作（如气管插管、中心静脉置管、导尿管留置）超过48小时的患者，操作前及操作期间每5天筛查；

4.近1个月内使用广谱抗生素（如碳青霉烯类、三代及以上头孢菌素、糖肽类）累计超过7天的患者，用药期间每7天筛查；

5.合并严重基础疾病（如恶性肿瘤晚期、糖尿病酮症酸中毒、慢性肾功能不全尿毒症期）或免疫功能低下（如HIV感染、长期使用激素或免疫抑制剂）的患者，入院时及住院期间每10天筛查；

6.来自MDRO流行区域（近3个月内科室MDRO检出率＞15%或医院MDRO检出率＞10%）的转科患者，转科后24小时内重新筛查。

（二）特殊人群

1.新生儿科收治的极低出生体重儿（＜1500g）、早产儿（＜37周）及有母婴传播风险（母亲为MDRO定植/感染者）的新生儿，出生后48小时内及生后第7天筛查；

2.长期护理机构（如养老院、康复中心）转入的患者，转入时及转入后第3天、第7天连续筛查3次；

3.疫情暴发期间（科室72小时内出现2例及以上同源MDRO感染），对同病室所有患者及密切接触医护人员进行全员筛查。

二、标本采集规范

（一）采集时机

1.常规筛查：入院/转入后24小时内完成首次采集，避免在标本采集前2小时内进行局部清洁（如鼻腔冲洗、会阴擦洗）或使用抗菌药物；

2.动态监测：高风险患者按筛查计划定期采集，采集时间固定为每日晨间护理前（6:00-8:00），以减少环境干扰；

3.紧急筛查：怀疑MDRO感染时（如发热伴感染指标升高），立即采集感染部位标本（如痰液、尿液、血液）与定植部位标本同步检测。

（二）采集部位与方法

1.鼻前庭拭子：用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）筛查。使用无菌聚酯纤维拭子（不含藻酸钙），轻轻插入单侧鼻孔1-2cm（儿童0.5-1cm），沿鼻黏膜旋转3周并停留5秒，退出后更换对侧鼻孔重复操作，将拭子插入含Amies转运培养基的管中，折断柄部密封；

2.直肠/肛门周围拭子：用于耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）、耐万古霉素肠球菌（VRE）筛查。患者取左侧卧位，暴露肛门，拭子蘸取少量无菌生理盐水，轻柔插入肛门2-3cm（儿童1-2cm），旋转3周后退出，避免接触粪便，立即置入含Cary-Blair转运培养基的管中；

3.伤口/造口周围拭子：用于多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-AB）、多重耐药铜绿假单胞菌（MDR-PA）筛查。先以无菌生理盐水清洁伤口周围皮肤，用2根拭子分别采集伤口边缘2cm内组织及渗液，一根用于涂片镜检，一根置入含硫乙醇酸盐肉汤的厌氧转运管；

4.咽拭子：用于多重耐药肺炎链球菌（DRSP）筛查。患者张口发“啊”音，用拭子快速擦拭双侧腭弓、咽后壁及扁桃体隐窝，避免接触舌面，置入含病毒保存液的管中（需同时检测病毒时）或普通转运培养基；

5.痰液标本：用于下呼吸道定植筛查。指导患者深咳留取深部痰液（＞1ml），避免唾液污染，收集于无菌螺口痰杯中（需2小时内送检）；无法自主咳痰者，经气管插管或气管切开处用无菌吸痰管采集，负压吸引时间＜15秒，置入含无菌生理盐水的50ml离心管。

（三）标本保存与运输

1.所有标本采集后需在2小时内送达实验室，若延迟送检，需置于4℃冰箱保存（不超过24小时）；

2.转运过程中使用防漏、防压的专用标本箱（内层铺吸水纸，外层标注“生物危害”标识），与其他标本分开放置；

3.急诊标本（如暴发疫情筛查）需在采集后1小时内送达，实验室优先处理。

三、实验室检测流程

（一）标本接收与登记

1.实验室专人核对标本信息（患者姓名、住院号、采集部位、采集时间）与申请单一致性，记录拒收原因（如标识错误、标本量不足、转运时间超过24小时）；

2.对合格标本进行条形码扫描，录入实验室信息系统（LIS），状态标记为“待处理”。

（二）标本处理与培养

1.鼻前庭拭子：接种于含6μg/mL头孢西丁的哥伦比亚血琼脂（用于MRSA筛选）及普通血琼脂（用于其他细菌分离），35℃需氧培养48小时；

2.直肠拭子：接种于CHROMagarCRE显色培养基（含美罗培南2μg/mL）及叠氮钠-结晶紫-七叶苷琼脂（用于VRE筛选），35℃需氧培养24-48小时；