第九章紫外可见分光光度法.pptVIP

第二节紫外-可见分光光度法八、测量误差与分析条件的选择（Ⅱ）显色反应条件的选择：(1)对显色剂及显色反应的要求(2)控制合适的显色反应条件参比溶液的选择：(1)溶剂参比溶液(2)试样参比溶液(3)试剂参比溶液(4)平行操作参比溶液第29页，共49页，星期日，2025年，2月5日课堂互动测定试样时，吸光度的读数应控制在0.2～0.7范围内。若吸光度读数不在此范围，可采用哪些方法进行调整?第二节紫外-可见分光光度法第30页，共49页，星期日，2025年，2月5日第二节紫外-可见分光光度法九、定性与定量分析方法（一）定性分析定性分析依据:最大吸收波长、吸光系数和吸收光谱曲线的形状。定性分析方法:(1)比较光谱的一致性(2)比较吸收光谱的特征数据及比值的一致性纯度检查：将药品光谱与药品标准光谱相对照，利用杂质的特征吸收，可以检测出微量杂质。第31页，共49页，星期日，2025年，2月5日实例分析中国药典(2005年版)规定：贝诺酯加无水乙醇制成每1ml约含7.5的溶液，在240nm处有最大吸收，相应的百分吸光系数()应为730～760。维生素B12也有三个吸收峰，分别在278nm、361nm、550nm波长处，它们的吸光度比值应为：A361nm/A278nm在1.70～1.88之间，A361nm/A550nm在3.15～3.45之间。第二节紫外-可见分光光度法第32页，共49页，星期日，2025年，2月5日第二节紫外-可见分光光度法（二）定量分析定量分析依据:A＝K·c定量分析方法：1.单组分溶液的定量方法(1)标准曲线法(2)标准溶液对比法(3)吸光系数法2.二元组分溶液的定量方法(1)解联立方程组法(2)等吸收波长消去法(3)差示分光光度法第33页，共49页，星期日，2025年，2月5日第二节紫外-可见分光光度法标准曲线法:标准曲线法是紫外-可见分光光度法中最经典的定量方法。具体测定的方法和步骤如下：①配制一系列不同浓度的标准溶液，选择合适的参比溶液，在相同条件下，以待测组分的最大吸收波长作为入射光，分别测定各标准溶液对应的吸光度。②以浓度c为横坐标、吸光度A为纵坐标描绘曲线，称为标准曲线，也叫工作曲线。③按照相同的实验条件和操作程序，用待测溶液配制未知试样溶液并测定其吸光度A样，在标准曲线上找到与之对应的未知试样溶液的浓度c样。第34页，共49页，星期日，2025年，2月5日第二节紫外-可见分光光度法第35页，共49页，星期日，2025年，2月5日全国高职高专药品类专业卫生部“十一五”规划教材分析化学（第2版）分析化学（第2版）全国高职高专药品类专业卫生部“十一五”规划教材*第1页，共49页，星期日，2025年，2月5日◆学习目的通过学习光谱分析法概论、紫外-可见分光光度法的基本原理、分光光度计的基本构造、降低测量误差的方法、常用的定性、定量方法等知识，了解光学分析法的知识体系，熟悉紫外-可见分光光度法的实际应用，会用紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度，并对有关物质进行定性定量分析，为学习红外分光光度法、荧光分光光度法、核磁共振波谱法及药物分析课中有关药品的定性鉴别、杂质检查和含量测定方法奠定基础。第2页，共49页，星期日，2025年，2月5日◆知识要求1．掌握朗伯-比尔定律概念、表示及条件，吸光系数和吸收光谱的意义、表示，常用的定量分析方法原理和应用。2．熟悉紫外-可见吸收光谱的产生机制、分光光度计的基本结构、偏离朗伯-比尔定律的主要因素。3．了解光谱分析法的分类、测量条件的选择、定性分析的依据和方法。第3页，共49页，星期日，2025年，2月5日◆能力要求1.能够用朗伯-比尔定律解决定量计算问题。2.能够绘制吸收光谱曲线，找出被测物质的最大吸收波长。3.能够制备标准曲线，并能应用标准曲线对样品进行定量分析。4.会使用常见的紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度。第4页，共49页，星期日，2025年，2月5日第一节光谱分析法概论第一节光谱分析法概论一、电磁辐射与电磁波谱电磁辐射：电磁辐射，也叫电磁波，具有波粒二象性。c＝λυE＝hυ电磁波谱：把电磁辐射按照波长大小顺序排列起来，就称为电磁波谱。紫外光区和可见光区仅是电磁波谱中的一小部分。第5页，共49页，星期日，2025年，2月5日表9-1