第六章酶与细胞固定化.ppt

（7）在果汁中的应用柑橘类产品加工中出现苦味是柑橘加工中的重要问题。造成苦味的物质有两类：一类为柠檬苦素的二萜烯二内酯化合物（A环和B环）；另一类为果实中的黄酮苷。脱苦的方法主要有吸附法和固定化酶法。吸附法是一次去除苦味物质，而固定化酶法主要是利用不同酶分别作用于柠檬苦素和柚皮苷，生成不含苦味的物质。工业上采用固定化柚皮苷酶减少柑橘类果汁中的柚皮苷含量。第61页，共116页，星期日，2025年，2月5日2、医药领域的应用（1）作为治疗药物固定化酶由于其高稳定性，低免疫性，使其在作为治疗药物时，较之溶液酶，表现出极大的优势。作为治疗药物，溶液酶具有一些“致命”弱点：①酶作为异体物质，反复应用会导致免疫反应②酶绝大多数是蛋白质，在体内易被网状内皮系统移除和被蛋白酶水解破坏。③由于稀释效应，药物酶无法集中于靶器官组织以达到治疗所需的最适高浓度。溶液酶的这些缺点，通过选择适宜的载体与方法将它们固定化以后就能逐一地加以解决。第62页，共116页，星期日，2025年，2月5日（2）作为“人工脏器”固定化酶可做成“人工脏器”参与体外循环，其应用主要有两方面：a.用于除去有害的毒性物质及有潜在毒害作用的代谢产物如清除尿毒症病人体内积累的尿素；进行这类应用时除了要考虑半寿期、免疫过敏等问题外，还要在“人工脏器”中偶联多种组成成分以彻底除去毒性产物。如处理尿素时，除了脲酶外，还要解决尿素分解生成氨的问题，这就需要另外加入谷氨酰胺合成酶或加入去氨的树脂等。第63页，共116页，星期日，2025年，2月5日b.除去(一种或多种)氨基酸，使需要这些物质的病变组织“饿死”治疗时只需将患者的血液引出体外，通过由固定化酶等构成的“人工脏器”加以处理，然后再流回体内。第64页，共116页，星期日，2025年，2月5日3、生物传感器生物传感器是利用生物物质作为识别元件将被测物浓度与可测量电信号关联起来的装置，生物传感器中研究最多的是酶传感器，其核心技术也是酶的固定化。Chen等将高聚物聚乙二醇二缩水甘油醚、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸等做成薄膜，用薄膜将葡萄糖氧化酶固定在金电极上，通过检测电信号可以测定血液中的葡萄糖含量。宋正华等将具有分子识别功能的β-葡萄糖苷酶和发光胺，分别固定在壳质胺和大孔阴离子交换树脂的填充柱中,组成流动注射系统，可以方便地确定苦杏仁甙的含量。第65页，共116页，星期日，2025年，2月5日4、环境保护固定化酶一个很大的用途是处理废水中一些有毒有害物质，防止污染。其中漆酶的固定化应用较为广泛，酚类化合物是废水中一类常见的高含量污染物，漆酶可以催化氧化酚类化合物，而且不用加入过氧化物酶。在废水处理中,由于组分复杂而且经常变化，利用单一的固定化酶，很难收到好的处理效果。因此，要用多酶固定化体系组合处理，才能使有机物完全矿化和保持无害稳定排放。第66页，共116页，星期日，2025年，2月5日第67页，共116页，星期日，2025年，2月5日第二节细胞固定化一、基本概念二、细胞固定化方法三、固定化细胞的特点四、固定化微生物细胞的应用五、固定化植物细胞六、固定化动物细胞第68页，共116页，星期日，2025年，2月5日细胞固定化技术：将细胞限制或定位于特定空间位置的方法。固定化细胞：被限定自由移动的细胞，即采用各种方法固定在载体上，在一定的空间范围内进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。一、基本概念第69页，共116页，星期日，2025年，2月5日固定化细胞与固定化酶相比，其优点：①不需要破碎细胞和分离提纯酶，减少了酶活力损失，可大大降低生产成本；②保持了胞内酶系原始状态与天然环境，因而酶更稳定；③保持了胞内原有的多酶系统，能催化一系列的反应，大大提高了催化效率，特别是对那些多酶反应、需要辅酶的氧化还原反应以及合成反应等，固定化细胞更具有明显的优势；④固定化细胞的制备与使用通常都比固定化酶更简便。第70页，共116页，星期日，2025年，2月5日二、微生物细胞固定化方法主要有吸附法、包埋法、交联法和无载体法。1、吸附法(1)定义：将细胞直接与水不溶性载体相结合的方法。(2)常用吸附剂：硅藻土，多孔陶瓷、多孔玻璃，多孔塑料、金属丝网、微载体和中空纤维等。(3)优点：操作简单，对细胞生长、繁殖和新陈代谢没有明显的影响。缺点：吸附力弱，吸附容量小，没有工业化生产。第71页，共116页，星期日，2025年，2月5日2、包埋法（最常用）：(1)定义：将细胞包埋于多孔载体内部而制成