高中生物 基因工程的基本操作程序.pptVIP

第1页，共22页，星期日，2025年，2月5日基因工程的基本操作程序1.目的基因的获取2.基因表达载体的构建3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定第2页，共22页，星期日，2025年，2月5日一、目的基因的获取主要是编码蛋白质的结构基因现代获取方法：1、从基因文库中获取目的基因2、利用PCR技术扩增目的基因3、人工合成初始目的基因的来源从生物中直接获取人工合成第3页，共22页，星期日，2025年，2月5日外显子内含子与RNA聚合酶结合位点编码区非编码区非编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶结合位点编码区原核生物基因真核生物基因第4页，共22页，星期日，2025年，2月5日原核细胞的基因结构原核细胞基因编码区（编码序列）：能指导有关蛋白质的合成，即能够编码蛋白质非编码区（调控序列）：位于编码区上游和编码区下游的DNA序列，虽不能指导有关蛋白质的合成，但有调控遗传信息表达的核苷酸序列，如启动子、终止子等第5页，共22页，星期日，2025年，2月5日原核细胞的基因结构RNA聚合酶的作用是催化DNA转录为RNA。它能够识别调控序列中的结合位点，并与其结合。转录开始后，RNA聚合酶沿DNA分子移动，并与DNA分子的一条链为模板合成RNA。第6页，共22页，星期日，2025年，2月5日真核细胞的基因结构与原核细胞比较，真核细胞基因结构的主要特点是：编码区是间隔的、不连续的。也就是说，能够编码蛋白质的序列被不能够编码蛋白质的序列分隔开来，成为一种断裂的形式。其中，能够编码蛋白质的序列叫做外显子，一般不能够编码蛋白质的序列叫做内含子。第7页，共22页，星期日，2025年，2月5日真核细胞的基因结构真核细胞基因编码区（间隔、不连续）外显子：能编码蛋白质的DNA序列内含子：不能编码蛋白质的DNA序列非编码区：与原核生物具有相似功能的启动子、终止子第8页，共22页，星期日，2025年，2月5日原核细胞与真核细胞的基因结构比较原核细胞真核细胞不同点编码区是连续的编码区是间隔的、不连续的相同点都由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成的第9页，共22页，星期日，2025年，2月5日启动子与终止子启动子是在非编码区内紧靠转录起点，调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，它能引导RNA聚合酶与正确的基因部位结合，使转录从起点开始，沿编码区进行。终止子是在非编码区内紧靠转录终点，调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。第10页，共22页，星期日，2025年，2月5日什么是内含子和外显子？原核细胞基因的编码区是连续的，真核细胞基因的编码区是间隔的、不连续的.真核生物基因的结构特点是：“编码区是间隔的、不连续的。”也就是说：能够编码蛋白质的序列被不能编码蛋白质的序列分隔开来，成为一种断裂的形式。其中，能够编码蛋白质的序列叫外显子，不能编码蛋白质的序列叫内含子。在成熟mRNA被保留下来的基因部分被称为外显子。真核基因包括编码区和非编码区，编码区又分为外显子和内含子,内含子不翻译蛋白质。知识拓展第11页，共22页，星期日，2025年，2月5日关于内含子和外显子的说法正确的是（）A.内含子和外显子在转录的过程中都能够转录成成熟的mRNA

B.只有外显子能够转录成mRNA，tRNA，rRNA

C.原核细胞基因中也有内含子和外显子

D.由于内含子不能编码蛋白质，故它属于非编码区知识拓展B第12页，共22页，星期日，2025年，2月5日目的基因的获得从基因文库获得基因文库利用PCR技术扩增人工合成基因组文库部分基因文库已知序列未知序列第13页，共22页，星期日，2025年，2月5日目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。基因操作的基本步骤一、提取目的基因——将需要的基因从供体生物

的细胞内提取出来。供体生物细胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因限制酶第14页，共22页，星期日，2025年，2月5日获取目的基因的方法：1、从基因文库中获取目的基因2、利用PCR技术扩增目的基因第15页，共22页，星期日，2025年，2月5日1、从基因文库中获取目的基因将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因文库基因