环境生物学第三章.pptVIP

五、蓄积毒性试验低于中毒阈剂量的外来化合物，反复多次地与机体持续接触，经一定时间后使机体出现明显的中毒表现，即为蓄积毒性作用是由于外来化合物进入机体的速度大于有机体消除的速度，而使外来化合物在体内的量不断累积，达到了使机体引起毒性作用的阈剂量所致。是引起亚慢性和慢性毒性作用的基础。是评估环境污染毒性作用的常用指标之一，也是制订其在环境中的卫生标准的重要参考依据。第29页，共64页，星期日，2025年，2月5日蓄积系数法（CumulativeCoefficientMethod）是分次给受试物后引起50%受试动物出现某种毒效应的总剂量，与一次给受试物后引起50%受试动物出现同一毒效应的剂量的比值蓄积系数K＝（比值愈小，表示蓄积作用愈强）第30页，共64页，星期日，2025年，2月5日第31页，共64页，星期日，2025年，2月5日生物半减期生物半减期（T1/2）是指一种外来化合物在体内消除到原有浓度（或量）的一半所需要的时间。生物半减期越长的物质，表示越不易由体内消除，其蓄积作用的可能性就越大。T1/2=第32页，共64页，星期日，2025年，2月5日动物细胞模型法采用动物细胞（如：非洲绿猴肾细胞）作为试验受体，通过细胞培养，观察含外源化学物质的培养基中细胞的生长情况（与对照相比较），从而确定化学物对细胞生长产生毒效应；测试时间一般只需48h，而且重复性好、成本低、可较直接反应对人体的影响。细胞水平检测：第三节生物的分子和细胞水平检测第33页，共64页，星期日，2025年，2月5日分子水平检测1：加合物的测定DNA－加合物的测定蛋白加合物的测定eg：Hb—加合物第34页，共64页，星期日，2025年，2月5日分子水平检测2：酶活性的测定方法：直接法：指直接测定体液中酶的含量，该法技术要求较高；间接法：通过测定酶反应中底物的减少或产物的增加量来确定酶的活性，该方法目前使用广泛，但要求反应专一性较高，反应结果与过程方便观察。第35页，共64页，星期日，2025年，2月5日酶活性的测定一般代谢酶的活性测定乙酰胆碱酯酶腺三磷酶解毒系统酶类诱导作用的检测混合功能氧化酶的诱导作用谷胱甘肽硫转移酶抗氧化防御系统检测过氧化氢酶谷胱甘肽过氧化酶第36页，共64页，星期日，2025年，2月5日第四节生物致突变、致畸和致癌效应检测

基本概念突变（Mutation）：生物体的遗传物质发生了基因结构的变化。基因突变（GeneMutation）和染色体畸变（ChromosomeMutation）基因突变：只涉及染色体的某一部分的改变，不能用光学显微镜直接观察染色体畸变：染色体的数目或结构发生改变，可用光学直接观察一、致突变试验第37页，共64页，星期日，2025年，2月5日致突变作用（Mutagenesis）和致突变物（Mutagen）致突变作用：某些物质引起生物体的遗传物质发生基因结构改变的作用致突变物：具有引起生物体的遗传物质发生基因结构变化的物质第38页，共64页，星期日，2025年，2月5日致突变试验的目的确定某种外来化合物（或环境污染物）对生物体是否具有致突变作用。致突变试验方法基因突变试验例如Ames试验、哺乳动物体细胞突变株试验染色体畸变试验DNA损伤试验第39页，共64页，星期日，2025年，2月5日Ames试验

（沙门氏菌回复突变试验）Ames试验原理利用一种营养缺陷型突变型菌株与受试物接触，若此化学物质具有致突变性，可使突变型微生物再发生回复突变，重新成为野生型微生物。注释1：营养缺陷型突变型菌株：不具合成组氨酸的能力，不能在低营养的培养基上生长注释2：野生型微生物：第40页，共64页，星期日，2025年，2月5日鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验法某些化学物质需经代谢活化才有致变作用，在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶，从而弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。方法：在动物体外将待测物经肝微粒体酶系活化后，检测其所诱发的沙门氏菌回变菌落数。突变率＝诱发回复突变菌落数/自发回复突变的菌落数（对照）当突变率大于2.0时，为阳性结果。第41页，共64页，星期日，2025年，2月5日Ames试验的应用检测食品添加剂、化妆品等的致突变性，由此推测其致癌性；检测水源水和饮用水的致突变性，探索较现行方法更加卫生安全的消毒措施；检测城市污水和工业废水的致突变性，结合化学分析，追踪污染源，为研究防治对策提供依据；检测土壤、污泥、工业废渣堆肥、废物灰烬的致突变性，以