动物细胞培养的准备.pptVIP

常用血清有胎牛血洁,新生牛血清,小牛血清,兔血清,马血清等,其中以胎牛血清质量最好.

优质血清的标准:透明,淡黄色,无沉淀物,无细菌,支原体,病毒污染.第61页，共90页，星期日，2025年，2月5日①多种PR（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）②多种金属离子③激素；④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分第62页，共90页，星期日，2025年，2月5日血清的使用与储存使用前的处理56℃灭活30min→去除补体成分储存条件灭活后分装成小包装（10mL、20mL、50mL），－20℃储存；使用前4℃融化，可用1个月。使用浓度一般为5％～20％，最常用的是10％。第63页，共90页，星期日，2025年，2月5日戊二醛消毒效力：高效浓度和用法：2％戊二醛溶液加入0.3％碳酸氢钠，成为2％碱性戊二醛，用于浸泡不耐高温的金属器械、医学仪器、内镜等，消毒需10-30min，灭菌需7-10h.第29页，共90页，星期日，2025年，2月5日注意事项：每周过滤1次，每2周应更换消毒液1次；浸泡金属类物品时，加入0.5％亚硝酸钠作为防锈剂；消毒灭菌后的物品，使用前用无菌蒸馏水冲净第30页，共90页，星期日，2025年，2月5日含氯消毒剂含氯消毒剂：常用的有漂白粉消毒效力：中、高效浓度和用法：0.5％漂白粉溶液、0.5％～1％氯胺溶液用于浸泡餐具、便器等，浸泡30min；1％～3％漂白粉溶液、0.5％～3％氯胺溶液喷洒或擦拭地面、墙壁及物品表面；排泄物消毒：干粪5份加漂白粉1份搅拌，放置2h，尿液100mL加漂白粉1g，放置1h第31页，共90页，星期日，2025年，2月5日注意事项：消毒剂保存在密闭容器内，置于阴凉、干燥、通风处，减少有效氯的丧失；配制的溶液性质不稳定，应现配现用；有腐蚀及漂白作用，不宜用于金属制品、有色衣服及油漆家具的消毒；3d更换一次消毒液第32页，共90页，星期日，2025年，2月5日乙醇消毒效力：中效浓度和用法：70％-75％用于皮肤消毒95％用于燃烧灭菌注意事项：易挥发，需加盖保存，定期测定，保持有效浓度有刺激性，不宜用于黏膜及创面消毒易燃，故应置于避火处第33页，共90页，星期日，2025年，2月5日苯扎漠铵(新洁尔灭)消毒效力：低效0.1％-0.2％用于皮肤消毒0.1%-0.2％用于金属器械消毒，浸泡15-30min(加入0.5％亚硝酸钠以防锈)第34页，共90页，星期日，2025年，2月5日注意事项：对肥皂、碘、高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投人纱布、棉花等对铝制品有破坏作用，故不可用铝制品盛装第35页，共90页，星期日，2025年，2月5日75％酒精、新洁尔灭、过氧乙酸、乳酸和洗必泰等都是常用的有效消毒剂。0.5％的过氧乙酸在10分钟内可将芽孢菌和各种病毒杀死；乳酸蒸汽常用做无菌室内或周围环境的定期消毒；75％酒精常用于超净台的台面、器械、实验操作者的皮肤等的消毒;0.1％新洁尔灭用于对桌、椅、地面、皮肤、操作台面进行擦拭或浸泡消毒；0.1％洗必泰水溶液用于皮肤浸泡消毒。

第36页，共90页，星期日，2025年，2月5日总结：物理消毒

（1）射线消毒：60Co、X射线，用于血清和塑料制品灭菌。（2）紫外线：器皿需结合75％酒精浸泡，照射30min。（3）干热灭菌：160?C，90～120min。主要用于玻璃、金属器皿。（4）湿热灭菌：121?C，30min；适用布、橡胶、某些塑料、金属、玻璃等。（5）过滤除菌：用孔径小于0.22μm的滤膜过滤，适用于培养用液和其他不能高压灭菌的溶液。第37页，共90页，星期日，2025年，2月5日总结：化学消毒

（1）70％（75％）酒精：用于手、器械、工作台面。（2）0.1％新洁尔灭：主要用于手的清洗和工作台面的清洗。（3）来苏水：主要用于桌椅、墙壁、地面的消毒，也可用于空气消毒。（4）0.5%过氧乙酸：10min可将芽孢菌杀死，用于表面消毒。（5）其他：乳酸、甲醛、高锰酸钾、氯等。第38页，共90页，星期日，2025年，2月5日无菌室的灭菌：

1.定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔?灭或者0.5％过氧乙酸擦拭。

2.CO2孵箱（培养箱）灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者