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专题二动物细胞工程
主要技术植物细胞工程技术动物细胞工程技术植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞培养动物细胞融合胚胎移植单克隆抗体技术核移植基础
资料:烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想如何来治疗该病人?取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。
一动物细胞培养的概念(P44)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。原理:细胞增殖想一想:动物细胞培养的基本原理是什么?
二动物细胞培养的过程结合图2-16,阅读P44最后一段至P46第一段结束。1、找出关键词并理解它们的含义。2、叙述动物细胞培养的过程。细胞贴壁细胞的接触抑制原代培养传代培养细胞悬液3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?不能。动物细胞培养的结果:使细胞数目增多。
(二)动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液10代细胞50代细胞剪碎胰蛋白酶或胶原蛋白酶原代培养细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,繁殖能力越强,越容易培养。动物细胞培养不能最终培养成生物体细胞增殖缓慢,核型可能变化动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。细胞贴壁接触抑制10代以内,保持正常二倍体核型传代培养
强调:有关概念原代培养:人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。一般指的是培养的第1代细胞与传10代以内的细胞。传代培养:贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。
强调:有关概念细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限传代,这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制。
通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官因为其分化程度低、增殖能力强,更容易培养。说明细胞与细胞间的主要物质是蛋白质1.动物细胞培养对培养的材料有要求吗?3.用胰蛋白酶处理,组织就会分散成单个细胞,说明了什么?2.为什么在培养前要将组织分散成单个细胞?利于培养,使细胞与培养液充分接触4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外,长时间的作用也会消化细胞膜蛋白,因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。5.人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?保存10代以内的细胞。因为10-50代部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。
(三)动物细胞培养的条件1、无菌、无毒环境(无菌处理和添加抗生素目的?更换培养液的好处?)2、营养与体内相同。合成培养基:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,通常需加入血清、血浆等一些天然成分。3、温度和PH,36~37℃、7.2~7.4)4、气体环境95%空气、5%CO2--维持培养液PH)
获得细胞或细胞产物细胞的全能性细胞数目增多一般为植物体培养结果快速繁殖、培育脱毒作物等培养目的动物血清植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较
P47最上面1、大规模的生产生物制品。2、作为基因工程的受体细胞。3、检测判断有毒物质及毒性4、培养正常或各种病变的细胞,用于生理、病理、药理等方面的研究,如用于等,为及其他疾病提供理论依据。(四)动物细胞培养技术的应用筛选抗癌药物治疗和预防癌症
课堂巩固1.下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是()
A.用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程
B.哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程C.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程
D.从机体取得细胞后立即进行培养的过程D
2.在动物细胞培养的有关叙述中,不正确的是A.动物细胞培养前先用胰蛋白酶使离体组织分散成单个体细胞B.动物细胞培养的目的就是为了获得大量的分泌蛋白C.动物细胞培养液的成分含葡萄糖、氨基酸、促生长因子、血清等D.将细胞培养在含有毒物质的溶液中,可通过变异细胞的百分率判断有毒物质的毒性?B
3.
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