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节节麦y-型高分子量谷蛋白亚基：鉴定、克隆与进化解析

一、引言

1.1研究背景

小麦作为世界上第一大粮食作物，在全球粮食生产和人类饮食结构中占据着举足轻重的地位。每年，小麦为人类提供约7000万吨的蛋白质，约占人类所消耗蛋白质总量的20%-30%，这一数量相当于肉、蛋、奶所提供蛋白质的总和。在中国，小麦同样是主要的粮食作物之一，其种植面积仅次于水稻，在保障国家粮食安全方面发挥着关键作用。

普通小麦（Triticumaestivum）是禾本科小麦属的一年生或越年生异源六倍体（6n=42，AABBDD）草本植物，其基因组由A、B、D三个不同来源的基因组组成。目前，虽然A和B基因组的祖先尚未完全确定（A基因组可能来自于一粒小麦（T.monococcum）或乌拉尔图小麦（T.urartu），B基因组最可能来自于拟斯卑尔脱山羊草（Ae.speltoides）），但四倍体的二粒小麦（T.turgidumL.，4n=28，AABB）被普遍认为是普通小麦A、B基因组的直接供体。而普通小麦的D基因组，则公认来自于节节麦（Triticumtauschii，2n=14，DD）。

由于小麦起源过程中存在瓶颈效应，加之长期的定向育种以及杂交育种中一些优良亲本的广泛利用，导致目前栽培小麦的遗传基础变得狭窄，遗传多样性程度较低。例如，1B1R小麦-黑麦易位系和代换系，因携带抗白粉病的Pm8和抗条锈病的Yr9基因，在全球范围内被广泛应用。在50多个国家育成的400多个小麦品种中，都含有1B1R种质，我国20世纪80-90年代推广的品种中，也有70%与1B1R种质存在直接或间接的亲缘关系。小麦栽培品种遗传基础的狭窄，不仅限制了小麦进一步的育种改良，还导致育成品种对不良环境抵抗能力下降，大规模病虫害发生的几率上升，危害加重。如20世纪70年代，中国小麦栽培品种普遍采用来自黑麦的单一抗白粉病基因Pm8，由于白粉病生理小种的变异，使Pm8抗性消失，从而造成中国栽培小麦大规模染病，给小麦生产带来重大损失。

栽培普通小麦的基因源是一个巨大的基因库，蕴含着丰富的遗传变异。因此，在小麦基因源中寻找并利用有益基因，成为小麦育种的有效手段。而节节麦作为普通小麦D基因组的供体，含有比普通小麦D基因组更为丰富的遗传变异，成为小麦育种中重要的遗传资源。对节节麦相关基因的研究，不仅有助于拓宽小麦的遗传基础，提升小麦的综合品质，还能为小麦的进化研究提供关键线索，具有重要的理论和实践意义。

1.2高分子量谷蛋白亚基概述

高分子量谷蛋白亚基（HighMolecularWeightGluteninSubunits，HMW-GS）是小麦籽粒中一类重要的贮藏蛋白，在种子储藏蛋白中占比约10%。它在决定小麦加工品质方面起着决定性作用，其组成和含量与小麦的加工品质密切相关。HMW-GS通过分子间二硫键共价交联，形成谷蛋白大聚合体，构成了面筋蛋白的“骨架”，对面筋强度有着关键影响，进而决定了面团的弹性。不同的高分子量谷蛋白亚基组合，会使小麦呈现出不同的加工特性。例如，Dx5+Dy10是公认的优质亚基组合，缺失Dx5亚基会降低沉降值，而过表达Dx5亚基则能增加面团强度。

在小麦的遗传研究中，HMW-GS也具有重要意义。由于其组成具有相对的稳定性和遗传性，可作为一种分子标记，用于小麦品种的鉴定、遗传多样性分析以及品质性状的遗传改良等方面。通过对HMW-GS的研究，可以更深入地了解小麦的遗传背景和品质形成机制，为小麦的遗传育种提供有力的理论支持。利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）技术，可以对小麦高分子量谷蛋白亚基的组成进行分析和鉴定，该方法具有准确、微量、快速、操作简便、分辨率高等优点，尤其是可以分析半粒无胚籽粒的HMW-GS组成，剩余的带胚半粒仍可用于播种或组织培养，因此在小麦品质研究和育种实践中得到了广泛应用。

1.3节节麦高分子量谷蛋白亚基研究现状

目前，关于节节麦高分子量谷蛋白亚基的研究已取得了一定成果。研究发现，节节麦存在广泛的高分子量谷蛋白亚基等位变异，其遗传变异类型比普通小麦基因组编码更为丰富。已在节节麦中鉴定出许多普通小麦中不存在的特有高分子谷蛋白亚基类型，如Dtx1.5+D‘ylO，品质分析推测该亚基组合可能与小麦优质烘烤品质有关。

对节节麦高分子谷蛋白亚基编码基因的研究也有进展。有研究利用限制性缺失法测定了D1x1.5+D‘Y10亚基编码基因全长开放阅读框的DNA序列并进行原核表达，发现D’X1.5和D‘y10亚基都具有与已