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;学习目标;;;1.动物细胞培养技术
(1)概念:指从动物体内获得相关组织,分散成细胞后,模拟环境,在温度适宜、营养充足、等条件下培养,使其继续生长、增殖的技术。
(2)过程;(3)培养条件
①温度和pH:培养温度和pH应与该种动物的体温、内环境pH相近。例如,培养哺乳动物细胞的最适温度一般为,最适pH范围为。
②合适的气体
a.气体组合:氧和二氧化碳。
b.大多数细胞在时不能很好存活,氧浓度过高也会对细胞产生,抑制其生长。
c.二氧化碳的含量则会影响培养液的。;③营养
a.主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、维生素和________
。
b.在培养基中通常需加入一定量的动物,以满足动物细胞培养的营养需要。
④无菌、无毒的环境
a.需要对培养基和培养器具进行处理。
b.必要时可添加适量的。
c.定期更换。;2.动物细胞培养技术的应用
(1)原代培养
①概念:指从供体获取细胞或组织后进行的培养。
②特征:细胞的生物学特性未发生很大变化,与体内细胞的_________
相近。
③应用:适合用于和等实验研究。;(2)传代培养
①原因:当细胞数量增加到一定程度后,由于的限制、_____
的消耗及有害代谢产物的积累等,细胞的便会逐渐
减缓。
②概念:将原代培养的细胞继续转接到上继续培养,这一过程称为传代培养。
③传代特点:传代培养10~50次后,细胞增殖速度便会,甚至完全停止,有些细胞可能还会发生。;(3)应用
①为细胞或细胞器加工改造提供了大量的动物细胞。
②广泛应用于、抗体、病毒疫苗等生物医药产品的工业化生产。
③应用于基因治疗、细胞治疗、组织工程、药物筛选和等相关领域的基础研究和临床实践等。;(1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性()
(2)培养的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞()
(3)动物细胞培养时,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH();;3.进???动物细胞培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?为什么?;5.动物细胞培养和植物组织培养的原理和目的有什么不同?;1.动物细胞培养的相关处理
(1)使细胞分散开的原因:一是能保证细胞所需要的营养供应;二是能保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
(2)使用胰蛋白酶时,要控制好作用时间,因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质,长时间作用还会分解细胞质膜蛋白等,对细胞造成损伤。进行动物细胞培养时不能用胃蛋白酶分散细胞,主要是因为pH不合适。
(3)动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶等处理,第一次使用的目的是使组织细胞分散开;贴壁细胞传代培养时使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,分散成单个细胞,便于分瓶后继续培养。;2.植物组织培养与动物细胞培养的比较;结果;1.如图为动物细胞培养的基本过程,以下叙述错误的是;解析将组织用胰蛋白酶等处理,制成b瓶中的细胞悬液,不能用胃蛋白酶处理,B错误。;解析植物组织培养与动物细胞培养都需要在无菌条件下进行,防止杂菌污染,A正确;
植物组织培养从外植体开始,即离体的器官、组织、细胞或原生质体,动物细胞培养从单个细胞开始,B错误;
植物组织培养的原理是细胞的全能性,动物细胞培养的原理是细胞增殖,C错误;
植物组织培养使用固体培养基,D错误。;;;题组一动物细胞培养技术
1.进行动物细胞培养时,处理组织细胞,使其分散,常用的试剂是
A.聚乙二醇 B.秋水仙素
C.胃蛋白酶 D.胰蛋白酶;2.在进行动物细胞培养时,需要
A.用胃蛋白酶处理以获得单细胞悬液
B.充入5%CO2以刺激细胞正常呼吸
C.加入经高压蒸汽灭菌的血清以提供营养
D.定期更换培养液以清除代谢产物;3.在将动物组织块分散成单个细胞时,可以使用胰蛋白酶。由此判断以下推测不合理的是
A.动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系
B.处理时一定要注意处理时间、加酶量
C.胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤
D.哺乳动物细胞培养液的pH应与胰蛋白酶作用的适宜
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