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2025年实验室安全知识题库及参考答案

1.实验室配制1mol/L硫酸溶液时，正确操作步骤是什么？

参考答案：①计算所需浓硫酸体积（根据浓硫酸浓度和目标浓度计算）；②佩戴防酸碱手套、护目镜、实验服，在通风橱内操作；③取适量去离子水于烧杯中（体积约为最终体积的1/3）；④将浓硫酸沿玻璃棒缓慢注入水中（禁止将水倒入浓硫酸），同时不断搅拌散热；⑤待溶液冷却至室温后，转移至容量瓶中定容；⑥贴标签注明名称、浓度、配制人及日期；⑦清理台面，将剩余浓硫酸归位至酸类试剂柜。

2.实验室发现装有氰化钾的试剂瓶标签模糊，应如何处理？

参考答案：①立即佩戴防毒面具、防渗透手套，在通风橱内操作；②使用pH试纸检测瓶内物质是否有异常反应（如遇酸产生HCN气体）；③联系实验室安全管理员，调取试剂采购记录核对原始信息；④若无法确认，视为不明剧毒物，按《危险化学品安全管理条例》要求，密封后存入双人双锁的剧毒试剂柜，并填写《不明危险化学品登记表》；⑤24小时内联系有资质的危废处理单位进行成分鉴定和规范处置。

3.高压蒸汽灭菌锅使用前需检查哪些关键项？

参考答案：①压力表：校验标签在有效期内，指针归零；②安全阀：手动测试排气是否顺畅；③水位线：加水至规定刻度（通常为内侧水位线2/3处）；④密封圈：检查是否老化、破损，无异物卡阻；⑤排水阀：确认无堵塞；⑥灭菌物品包装：使用透气材质（如医用皱纹纸），体积不超过灭菌腔室80%；⑦电路连接：电源线无破损，接地良好；⑧操作记录：确认上一次使用后已完成清洁和故障排查。

4.进行细胞培养实验时，生物安全柜内物品摆放的正确原则是什么？

参考答案：①从清洁区到污染区单向摆放：左侧放置未使用的培养基、耗材，中间为操作区，右侧放置使用过的废弃物；②物品间距≥5cm，避免遮挡气流；③大体积物品（如离心管架）放置于底部，小物品置于上层；④酒精灯远离安全柜进风口（距离≥15cm），防止干扰层流；⑤所有物品表面用75%酒精擦拭消毒后再放入；⑥柜内仅放置本次实验必需物品，禁止堆积；⑦操作完成后，用含氯消毒液（500mg/L）擦拭台面，开启紫外灯照射30分钟。

5.实验室发生甲醇泄漏（约500mL），现场无人员受伤，应如何处置？

参考答案：①立即停止实验，关闭邻近热源（如酒精灯、电炉）；②佩戴防有机蒸汽的防毒面具（APR型，滤毒盒为有机气体类）、防化手套；③用沙土或蛭石覆盖泄漏区域（避免使用锯末等易燃材料），从外围向中心围堵；④用防爆型吸液泵或塑料铲将吸收材料转移至防漏的专用危废桶（贴“有机废液”标签）；⑤用大量清水冲洗地面（注意防止流入下水道，需通过实验室废水预处理系统）；⑥检测空气中甲醇浓度（使用便携式VOC检测仪），低于50mg/m3（PCSTEL）方可恢复操作；⑦填写《危险化学品泄漏处置记录表》，记录泄漏量、处置过程及后续整改措施（如检查试剂瓶密封性、增设防泄漏托盘）。

6.实验室烘箱长时间使用后，发现加热时异味明显，应采取哪些措施？

参考答案：①立即断电，停止使用；②待烘箱冷却后，打开门通风30分钟；③检查内部是否有残留样品（如含挥发性有机物的材料）碳化；④用中性清洁剂擦拭内壁（禁止使用强腐蚀性试剂），清理加热管表面积垢；⑤联系设备管理员检测温控系统（检查热电偶、继电器是否老化）；⑥测试烘箱密封性（用烟雾测试法，观察门封是否漏风）；⑦校准温度传感器（使用标准温度计比对）；⑧若异味来源不明，委托专业机构进行空气质量检测；⑨整改完成后，进行空载运行测试（60℃运行2小时无异味），并更新设备维护记录。

7.进行PCR实验时，如何避免扩增产物污染？

参考答案：①分区操作：设置试剂准备区、样本处理区、扩增区、产物分析区，单向流动；②专用器材：每个区域使用独立的移液器、离心管、手套，不得交叉使用；③空气消毒：各区每日用紫外灯照射60分钟（波长254nm），产物分析区需额外用3%过氧化氢喷雾消毒；④操作规范：开启离心管前短暂离心，避免气溶胶扩散；加样时移液器吸头垂直进入管内，避免触碰管壁；⑤阳性对照设置：使用低浓度标准品（≤100拷贝/μL），单独存放于产物分析区；⑥废弃物处理：所有使用过的耗材经121℃高压灭菌30分钟后，按感染性废物处置；⑦定期检测：每月用阴性对照（无模板反应）监测污染，若出现扩增条带，立即用DNA酶擦拭台面和器材。

8.实验室气瓶存放的安全要求有哪些？

参考答案：①分类存放：可燃气体（如H?、CH?）与助燃气体（如O?）间距≥5m，惰性气体（如N?、Ar）可同区域但需隔离；②固定措施：使用气瓶柜或防倒链固定，高度超过1.5m的气瓶需双点固定；③环境要求：存放间通风良好（每小时换气≥12次），温度≤40℃，避免阳光直射；④标识管理：每瓶张贴气体名称、危险性标签（如“易燃”“氧化性”）