（2025）免疫组织化学质控物的专家共识学习与解读PPT课件.pptxVIP

(2025)免疫组织化学质控物的专家共识学习与解读精准质控，规范实践

目录第一章第二章第三章共识背景与概述质控物制备规范质控物应用流程

目录第四章第五章第六章质量评估体系临床实践指导未来发展方向

共识背景与概述1.

免疫组化质控物是经过严格设计的标准化样本，含有已知抗原表达水平，用于监控实验流程的稳定性和试剂性能，确保检测结果的可重复性。标准化工具通过质控物可实时评估染色强度、背景干扰及抗体特异性，及时发现脱蜡、抗原修复或染色步骤中的技术偏差。实验过程监控质控物作为阳性/阴性对照，辅助判断待测样本的染色结果是否真实反映目标抗原表达，避免假阳性或假阴性误判。结果可靠性验证统一质控物的使用有助于不同实验室间检测结果的标准化比较，提升多中心研究或临床诊断的一致性。实验室间可比性免疫组化质控物定义与作用

2025版共识更新背景随着自动化免疫组化平台和多重染色技术的普及，原有质控标准需适配新技术，如针对低表达抗原或新型抗体的质控物设计。技术发展需求既往质控物应用存在判读标准不统一、基质模拟不足等问题，更新旨在解决实际应用中的争议（如异质性组织的质控挑战）。临床问题驱动结合国际指南（如CAP/ASCO标准）及国内实践，填补质控物制备、存储等环节的标准化空白，推动行业质量提升。行业规范完善

01明确质控物的选择原则（如组织类型、抗原稳定性）、设置频率（每批次/每日）及位置（同批次切片中随机分布）。指导质控实践02通过规范质控物判读标准（如半定量评分系统），减少主观差异，确保HER2、PD-L1等关键标志物检测的临床决策可靠性。提升检测准确性03适用于病理实验室从样本前处理（固定、包埋）到染色、显微镜检查的全链条质量控制，包括常规诊断和科研场景。覆盖全流程管理04为基层医院或新开展IHC检测的机构提供可操作性方案，降低技术门槛，推动精准病理诊断的普及。促进技术推广核心目标与适用范围

质控物制备规范2.

优先选择与人体组织相近的动物源性基质（如小鼠肝脏、胎盘组织），确保抗原表位保存完整且无交叉反应。需通过HE染色和IHC预实验验证组织结构的适用性。生物相容性要求质控物需包含至少2种明确表达的靶抗原（如ER、HER2），并附带第三方验证报告，确保抗原表达强度梯度（弱/中/强）覆盖临床检测需求。靶抗原明确性原材料供应商需提供同一批次的病理学特征数据（如细胞密度、纤维化程度），CV值应≤15%，避免因组织异质性导致质控偏差。批次间一致性控制采用中性缓冲福尔马林固定（浓度4%，pH7.2-7.4），固定时间控制在24-48小时，避免过度交联影响抗原修复效果。防腐处理合规性原材料选择标准

切片厚度精度使用校准后的切片机，厚度控制在4±0.5μm，每100张切片需进行厚度抽检（采用显微测厚仪），允许误差范围±0.2μm。防脱片处理采用多聚赖氨酸或APES包被载玻片，经60℃烘烤1小时后进行粘附力测试（≥95%组织完整率）。质控物分区设计每个质控块应包含阳性质控区（已知高表达靶标）、阴性质控区（同型对照）及梯度表达区（如HER20/1+/2+/3+），分区间距≥2mm以避免交叉污染。制备流程标准化要求

将质控物置于37℃环境储存14天，模拟常温下6个月的性能变化，要求抗原性衰减≤10%（通过H-score评估）。加速老化实验经历5次-80℃至25℃循环后，免疫反应性降低幅度需＜15%，且组织结构无显著破坏（经病理医师盲评确认）。冻融循环测试建立质控物有效期内的季度检测制度，重点评估背景着色、非特异性结合等参数，数据纳入LIS系统进行趋势分析。实时稳定性监测模拟夏季（40℃）及冬季（-20℃）极端环境运输72小时，要求切片完整性≥90%，且无抗原弥散现象（通过显微镜下观察判定）。运输条件验证稳定性验证方法

质控物应用流程3.

标准化操作步骤质控物同步检测结果判读与记录严格执行SOP文件，包括抗原修复、抗体孵育时间、温度控制等关键环节，确保实验条件一致性。每批次实验需同步运行阳性和阴性质控物，验证试剂性能及实验系统稳定性。采用双盲法由两名病理医师独立评估染色结果，记录染色强度、定位准确性及背景清晰度等参数。日常检测操作规范

染色一致性评估标准通过标准化的评分系统（如H-score或Allred评分）量化染色强度，确保不同批次间阳性信号的一致性。阳性对照强度评估要求非特异性染色低于预设阈值（如DAB背景吸光度≤0.1），避免假阳性干扰结果判读。背景染色控制靶蛋白表达应严格匹配预期组织学定位（如细胞膜、胞质或核），偏差率需5%方符合质控要求。组织定位准确性

结果判读阈值设定阳性/阴性对照阈值标准化：依据抗体克隆号和组织类型，通过ROC曲线分析确定最佳临界值，确保敏感性与特异性平衡。梯度稀释法验证：采用系列稀释质控物建立浓度-显色强度曲线，明确可接受