Cry蛋白结构域互换与RNAi技术协同培育转基因抗褐飞虱水稻的探索.docxVIP

Cry蛋白结构域互换与RNAi技术协同培育转基因抗褐飞虱水稻的探索

一、引言

1.1研究背景

水稻（OryzasativaL.）作为全球最重要的粮食作物之一，为超过半数的世界人口提供主食。中国作为水稻种植大国，水稻种植历史悠久，种植区域广泛。2023年，我国水稻种植面积达2951.9万公顷，产量达2.05亿吨，在保障国家粮食安全方面发挥着举足轻重的作用。水稻不仅是人们餐桌上的主要食物来源，还在食品加工、饲料生产等领域有着广泛应用，对经济发展和社会稳定意义重大。

然而，在水稻种植过程中，面临着众多病虫害的威胁，其中褐飞虱（NilaparvatalugensSt?l）已成为影响水稻产量和质量的关键害虫之一。褐飞虱属半翅目飞虱科，是一种典型的迁飞性害虫，具有繁殖速度快、食性专一的特点，主要依靠气流进行远距离迁飞，且仅取食水稻和野生稻。其每年发生代数自北而南递增，喜温暖高湿的气候条件，在适宜环境下易在水稻穗期暴发成灾。据统计，20世纪80年代末以来，我国褐飞虱每年发生面积为1300万-2600万hm2，约占水稻种植面积的50%，虽经防治，年均损失稻谷仍达10亿-15亿kg。1991年褐飞虱特大发生，涉及19个省份，部分地区甚至绝收，估计该年全国实际损失稻谷25亿kg；2005年褐飞虱在我国长江流域及以南各省份特大发生，直接损失稻谷超过26亿kg。

褐飞虱对水稻的危害是多方面且极其严重的。在直接吸食危害方面，成、若虫群集于稻丛底部，通过刺吸茎叶组织汁液，致使水稻植株含水量迅速下降。同时，其唾液腺分泌的有毒物质会破坏水稻植株组织，在受损茎上形成褐色斑点，受害严重时可引起稻株基部变黑，最终导致水稻瘫痪倒伏，俗称“冒穿”“虱烧”“透天”，严重情况下可造成绝收。在产卵危害方面，雌虫产卵时，锋利的产卵管会穿透叶鞘和茎组织，形成大量伤口，不仅加速水分散失，还为水稻小球菌核病提供了直接入侵途径。此外，褐飞虱还会传播锯龄叶矮缩病、水稻草丛状矮缩病等病害，其取食时排泄的蜜露富含糖类、氨基酸类，易招致煤烟病菌滋生，进而影响水稻的光合作用。

为了有效控制褐飞虱的危害，化学防治一直是主要手段之一。然而，长期大量使用化学杀虫剂带来了诸多弊端。一方面，化学杀虫剂的使用对环境造成了严重污染，破坏了生态平衡，影响了有益生物的生存和繁衍。另一方面，褐飞虱对多种常用化学杀虫剂产生了不同程度的抗性，使得防治效果逐渐下降，导致农药使用量不断增加，形成恶性循环。同时，化学防治还可能导致农产品中农药残留超标，威胁人类健康。因此，培育抗虫转基因水稻品种成为解决褐飞虱危害的迫切需求，对于保障水稻产量、提高稻米品质、减少农药使用、保护生态环境具有重要意义。

1.2水稻抗虫育种研究现状

1.2.1常规抗虫育种

常规抗虫育种是利用传统的育种方法，如杂交、回交、选择等，将抗虫基因从抗虫品种或野生稻资源中导入到优良水稻品种中，以培育出具有抗虫性的新品种。在过去的几十年里，常规抗虫育种取得了一定的成果。通过广泛收集和筛选水稻种质资源，育种家们发现了一些对褐飞虱具有抗性的材料，并利用这些材料与优良品种进行杂交和回交，培育出了一系列抗褐飞虱的水稻品种。例如，国际水稻研究所（IRRI）培育的IR36、IR64等品种，在一定程度上表现出对褐飞虱的抗性，这些品种在亚洲多个国家得到了广泛种植，对控制褐飞虱危害发挥了重要作用。

然而，常规抗虫育种也存在一定的局限性。首先，抗虫基因的来源相对有限，主要依赖于已有的水稻种质资源和野生稻，且野生稻与栽培稻杂交存在杂交不亲和、杂种不育等问题，增加了育种难度。其次，常规育种周期长，需要经过多代杂交、回交和选择，才能获得稳定遗传的抗虫品种，耗费大量的时间和人力物力。此外，常规育种难以准确地将抗虫基因导入到目标品种中，可能会同时引入一些不良性状，需要进行多次筛选和改良。

1.2.2转基因抗虫育种

转基因抗虫育种是利用基因工程技术，将外源抗虫基因导入到水稻基因组中，使水稻获得抗虫性。与常规抗虫育种相比，转基因抗虫育种具有目标明确、育种周期短、可打破物种界限等优点。目前，用于水稻抗虫转基因育种的主要抗虫基因包括苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis，Bt）产生的Cry蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、凝集素基因等。

苏云金芽孢杆菌产生的Cry蛋白是目前应用最广泛的抗虫蛋白之一。Cry蛋白根据其氨基酸序列和杀虫谱的不同，可分为多个类型，如Cry1、Cry2、Cry3等。其中，Cry1类蛋白主要对鳞翅目害虫具有毒杀作用，Cry2类蛋白对鳞翅目和双翅目害虫都有活性，Cry3类蛋白则主要针对鞘翅目害虫。在水稻抗褐飞虱转基因育种中，一些Cry蛋白基因也