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无菌操作技术规范及注意事项详解

引言

无菌操作技术，作为医疗卫生、生物制药、科研实验等领域的基石，其核心目标在于通过一系列严格的操作规程，最大限度地减少乃至消除微生物的污染风险，从而保障操作对象的无菌性，确保实验结果的准确性、产品的质量稳定性以及患者的医疗安全。这项技术并非孤立的操作集合，而是一套融合了环境控制、人员行为规范、物品管理和操作技巧的系统性学问。其规范与否，直接关系到后续工作的成败与安全。因此，深入理解并熟练掌握无菌操作的每一个细节，是每一位相关从业人员的基本素养与责任。

一、人员准备与行为规范

人员自身是无菌操作环境中潜在的最大污染源之一，因此，严格的人员准备与行为规范是无菌操作的第一道防线。

1.1个人卫生与着装要求

操作前，必须进行彻底的个人清洁，包括沐浴、修剪指甲（指甲缝内易藏匿污垢和微生物），去除手部及手臂的首饰、手表等可能影响消毒效果或造成勾挂污染的物品。进入特定洁净区域前，需按规定更换专用的清洁工作服、工作帽、口罩和工作鞋。工作帽应能完全包裹头发，口罩需遮盖口鼻，确保无毛发、皮屑及飞沫散落。必要时，如在洁净度要求更高的环境，还需佩戴护目镜或面罩，并穿着无菌隔离衣或防护服。

1.2手卫生与消毒

手卫生是无菌操作中最为关键的环节之一。在进行无菌操作前，必须按照规范的手卫生流程进行洗手和手消毒。通常采用“六步洗手法”或“七步洗手法”彻底清洁双手，去除可见污垢和暂居菌，随后使用合适的手消毒剂进行消毒，确保手部达到规定的无菌要求。操作过程中，若手部受到污染或怀疑污染，应立即重新进行手卫生。

1.3操作前行为控制

操作前应避免进行可能产生扬尘或飞沫的活动，如剧烈运动、大声交谈、咳嗽或打喷嚏。若有呼吸道感染症状，应避免参与无菌操作或采取更高级别的防护措施。操作前应调整好个人状态，确保精神集中，避免在操作过程中分心或进行与操作无关的活动。

二、环境控制与无菌区域设定

适宜的操作环境是无菌技术实施的基础保障，其核心在于减少环境中的微生物负载，并通过物理或化学方法维持特定区域的相对无菌状态。

2.1操作环境的清洁与消毒

操作前，应对工作台面、地面、墙壁及相关设备表面进行常规清洁和消毒。清洁应遵循由上至下、由洁至污的原则，消毒则需选用合适的消毒剂，确保作用时间和浓度，以有效杀灭环境表面的微生物。对于生物安全柜、超净工作台等核心设备，应定期进行性能验证和清洁消毒。操作期间，应保持环境的安静和整洁，避免不必要的人员走动和物品摆放。

2.2无菌区域的建立与维护

无菌区域并非指绝对无菌，而是指通过严格的操作规程，使该区域内的微生物数量控制在极低水平，达到“可接受的无菌风险”。通常以无菌操作台（如生物安全柜内、超净工作台内）或经严格消毒的特定区域作为操作的核心无菌区。在该区域内，所有物品的摆放应合理有序，避免交叉污染。操作时，操作人员的手臂应在无菌区域内活动，避免跨越或触碰非无菌物品。无菌区域一旦建立，应尽量减少不必要的暴露和干扰。

三、无菌物品的管理与使用

无菌物品是无菌操作的物质基础，其质量和使用方法直接影响操作的无菌效果。

3.1无菌物品的识别与检查

使用无菌物品前，必须仔细检查其包装是否完好无损，有无潮湿、破损、污渍等情况。同时，需确认灭菌指示标识是否达到灭菌合格标准，并核查灭菌日期和有效期，严禁使用过期、包装破损或灭菌不合格的物品。

3.2无菌物品的取用原则

取用无菌物品时，必须使用无菌持物钳、镊或其他无菌器具。手臂应保持在腰部或操作台面以上水平，不可跨越无菌区。无菌物品一经取出，即使未用，也不可再放回无菌容器内，以防止交叉污染。传递无菌物品时，应遵循无菌原则，避免手与无菌物品直接接触。

3.3无菌容器的使用规范

开启无菌容器时，盖（或塞）的内面应朝上放置，避免与非无菌表面接触。取用物品后，应立即将容器盖严。手持无菌容器时，应托住容器底部，手指不可触及容器边缘及内面。无菌容器应定期消毒灭菌，确保其持续无菌状态。

四、核心操作技术要领

无菌操作的核心技术是确保操作过程中不引入微生物污染的关键环节，需要精准掌握并严格执行。

4.1无菌持物钳/镊的使用

根据操作需求选择合适的无菌持物钳或镊。使用时，应保持钳/镊的前端始终向下，不可倒转，以免消毒液倒流污染钳/镊头部。取放无菌持物钳/镊时，应闭合钳端，垂直出入无菌容器，避免触及容器口边缘。使用过程中，钳/镊不可触及非无菌物品，也不可用于夹取油纱布或进行皮肤消毒。使用后应立即放回原容器内，并确保钳/镊头部浸泡在规定深度的消毒液中。

4.2无菌手套的穿戴与使用

戴无菌手套前，应检查手套包装是否完好、型号是否合适。穿戴时，应遵循“未戴手套的手不可触及手套外面，已戴手套的手不可触及未戴手套的手或另一手套的内面”的原则。若手套有破损或污染，应立即更换。操作结束后，应按规定