植株再生途径分类.docxVIP

外植体的成苗途径

植株再生途径一般可划分为无菌短枝型、器官发生型、丛生芽增殖型、胚状体、原球茎发生型五种类型。所形成的植株称为再生植株。

（一）无菌短枝型将顶芽、侧芽或带有芽的茎切段接种到伸长(或生长)培养基上，进行伸长培养，逐渐形成一个微型的多枝多芽的小灌木丛状的结构。继代时将丛生芽苗反复切段转接，重复芽－苗增殖的培养，从而迅速获得较多嫩茎(在特殊情况下也会生出不定芽，形成芽丛)。这种增殖方式也称作“微型扦插”或“无菌短枝扦插”。将一部分嫩茎切段转移到生根培养基上，即可培养出完整的试管苗。这种方法主要适用顶端优势明显或枝条生长迅速，或对组培苗质量要求较高的一些木本植物和少数草本植物，如月季、枣树、葡萄、矮牵牛、茶花、菊花、香石竹等等。由于不经过愈伤组织诱导阶段，是最能使无性系后代保持原品种特性的一种繁殖方式。实践中应注意芽位的选取，一般以上部3～4节的茎段或顶芽为宜。

（二）丛生芽增殖型茎尖、带有腋芽的茎段或初代培养的芽，在适宜的培养基上诱导，可使芽不断萌发、生长，形成丛生芽。将丛生芽分割成单芽增殖培养成新的丛生芽，如此重复芽生芽的过程，可实现快速、大量繁殖的目的。将长势强的单个嫩枝进行生根培养，培养成再生植株。

（三）器官发生型外植体经诱导脱分化形成愈伤组织，再由愈伤组织细胞分化形成不定芽(丛生芽)。这种途径也称为愈伤组织再生途径。有些植物能够直接从外植体表面产生不定芽，如矮牵牛、福禄考、悬钩子、百合、银杏、柏科和松科的一些植物等。

（四）胚状体发生型胚状体类似于合子胚但又有所不同，它也通过球形胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶形胚的胚胎发育过程，形成类似胚胎的结构，最终发育成小苗，但它是由体细胞发生的。胚状体可以从愈伤组织表面或悬浮培养的细胞发生，也可从外植体表面已分化的细胞产生。它是植物离体无性繁殖最快的途径，也是人工种子和细胞工程常用的发生途径，但有的胚状体存在一定的变异，应经过试验和检测后才能在生产上大量应用。图4-2和图4-3分别显示胡萝卜和石龙芮胚状体的形成和分化过程。

由于胚状体发生和器官发生均可起源于愈伤组织或者直接来自于外植体，因此这两种再生植株常常容易混淆，表4-5列出了这两种再生植株的主要区别。

表4-5胚状体苗与器官发生苗的区别

胚状体苗

器官发生苗

1.最初形成多来自单个细胞，双向极性，两个分生中心，较早分化出茎端和根端(方向相反)

1.最初形成多来自多细胞，单向极性，单个分生中心

2.胚状体维管组织与外植体维管组织不相连

2.不定芽和不定根与愈伤组织的维管组织相连

3.具有典型的胚胎形态发生过程

3.无胚胎形态，分生中心直接分化器官

4.形成的幼苗具有子叶

4.不定芽的苗无子叶

5.胚状体发育的苗，根和芽齐全，不经历诱导生根阶段

5.一般先长芽后诱导生根，或先长根后长芽

图4-2胡萝卜胚状体的形成和分化过程

图4-3石龙芮胚状体的形成和分化过程

?（五）原球茎发生型原球茎是一种类胚组织，可以看作呈珠粒状短缩的、由胚性细胞组成的类似嫩茎的器官。一些兰科植物的茎尖或侧芽培养可直接诱导产生原球茎，继而分化成植株，也可以通过原球茎切割或针刺损伤手段进行增殖培养