酶工程--固定化酶.pptVIP

**（1）测定固定化酶的活力，以确定固定化过程的活力回收率。（2）考察固定化酶稳定性（3）考察固定化酶最适反应条件1离子键结合法2共价键结合法☆（1）酶蛋白N末端的α-氨基或赖氨酸残基的ε-氨基。（2）酶蛋白C末端的α-羧基、天门冬氨酸残基的β-羧基以及谷氨酸残基的γ-羧基。（3）苯丙氨酸和酪氨酸残基的苯环。（4）其他：半胱氨酸残基的巯基；丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的羟基；组氨酸残基的咪唑基；色氨酸残基的吲哚基。常用载体：天然高分子、人工合成的高聚物、无机载体载体上与酶偶联的基团：芳香氨基、羟基、羧基和羧甲基（1）载体的物化性质要求载体亲水，并且有一定的机械强度和稳定性，同时具备在温和条件下与酶结合的功能基团。

（2）偶联反应的反应条件必须在温和pH、中等离子强度和低温的缓冲溶液中。

（3）所选择的偶联反应要尽量考虑到对酶的其它功能基团副反应尽可能少。

（4）要考虑到酶固定化后的构型，尽量减少载体的空间位阻对酶活力的影响。

首先载体上引进活泼基团关键