HWTXⅠ对全脑缺血大鼠脑组织自由基及海马神经元损伤保护作用研究.pdf

捅 要 目的：观察虎纹捕鸟蛛毒素．I(HWTX．I)对全脑缺血再灌注损伤 体细胞Nissl染色形态学变化、CAl区锥体细胞胞内线粒体形态变化、 、 讨其改善全脑缺血再灌注损伤的机制，为颅脑损伤新的临床治疗手段 提供实验依据。 研究方法：成年雄性SD大鼠88只，大鼠随机分为5组：假手 术组(n一24)、生理盐水组(n-24)、HWTX．I O．5“眺g组(n_8)、HWTX．I 1．O肛g／l(g组(n=24)、HwTX—I2．O嵋／l(g组(n=8)。其中每组大鼠8 只用于检测脑组织SOD、CAT活力及MDA含量变化；假手术组、 生理盐水组、HWTX．I 1．O雌瓜g组每组8只用于观察海马CAl区锥体 细胞Nissl染色形态学变化、Ba)【和bcl．2等凋亡相关因子蛋白表达水 平的影响，另每组8只用于观察海马神经细胞胞内线粒体形态学变 化、Bax和bcl．2等凋亡相关因子训[矾A表达水平的影响。所有大鼠 ● (假手术组除外)经四血管阻断全脑缺血结合蛛网膜下腔置管术经适当 - 改进后应用于本研究。 研究结果： (1)与生理盐水组比较，三组用药组大鼠脑组织匀浆SOD活力随着 单位剂量的增加随之升高，组间比较差异无显著统计学意义。2．与 生理盐水组比较，三组用药组大鼠脑组织匀浆MDA含量随着单位剂 量的增加随之降低，生理盐水组与2．0耀肚g组比较差异具有显著统计 学意义(PO．05)。3．与生理盐水组比较，三组用药组大鼠脑组织匀 浆CAT活力随着单位剂量的增加随之升高，生理盐水组与2．O烬肚g 组比较差异具有显著统计学意义(PO．05)。 见数层锥体神经元，排列整齐紧密；而HWTX．I 1．O耀肚g组海马锥体 细胞则略为疏散分布；生理盐水组海马锥体细胞排列散乱，层次不完 整，呈稀疏分布。 (3)电镜下观察到假手术组海马锥体细胞线粒体嵴清晰可见，未见 线粒体嵴断裂现象；HWTX—I 1．Opg／l(g组也未见明显线粒体嵴断裂现 象；而生理盐水组则可见线粒体嵴模糊不清，出现空泡化现象。 (4)应用免疫组织化学染色法观察到假手术组海马CAl区几乎未 见Bax阳性细胞表达；HWTX．I 1．Op眺g组海马CAl区可见Bax阳 性细胞表达，阳性细胞稀疏分布；而生理盐水组海马CAl区可见BaX 阳性细胞表达，且阳性细胞呈集中密集分布。 (5)应用免疫组织化学染色法观察到假手术组海马CAl区仅有少量 bcl．2阳性细胞表达；生理盐水组海马CAl区可见bcl．2阳性细胞表 达，阳性细胞稀疏分布；而H1ⅣrX．I 1．O耀肚g组海马CAl区可见bcl． 一2阳性细胞表达，且阳性细胞呈集中密集分布。 (6)ImPCR法检测到HWTX．I rn】ⅢA 1．O¨眺g组大鼠海马组织Bax 的表达较生理盐水组低，两组比较虽无统计学意义，但HWTX—I 1．O“g／l(g组BaX删吼～的表达较生理盐水组呈下降趋势。 (7)RT-PCR法检测到HWTX．I mI姒A 1．O斗g／l(g组大鼠海马组织bcl．2 的表达较生理盐水组高， HWTX．I