(三)某些重要学科地研究方法.ppt

包括： 细胞生物学 分子生物学 神经科学 病理学 细胞生物学 细胞水平的研究 对恶性肿瘤细胞生长的影响（生长曲线） 2. 对恶性细胞增殖的影响（分裂指数测定，成集落实验） 对恶性肿瘤细胞代谢的影响（DNA，蛋白质合成的影响） 4. 器官培养实验 动物水平的研究 对致瘤动物的治疗作用 2. 动物的肿瘤细胞接种实验 分子水平的研究 对已知癌基因与抑癌基因的作用 2. 发现未证明的基因或抑癌基因 关 于 对 照 配对的细胞（SV3T3-3T3） 癌细胞与正常或原代培养细胞 3. 癌细胞，癌旁组织细胞及正常细胞 分子生物学 细胞的转化试验（细胞的选择） 动物的致瘤试验（动物的选择） 对癌基因，抑癌基因的分析 最关心的共同问题 一般设计原则 如何从遗传学角度确定疾病的致病基因或易感基因？ 对一个感兴趣的基因如何研究其功能？ 医学分子生物学实验设计中常见的毛病 实例分析 神经科学现代研究方法 一、形态学方法 束路追踪法：轴浆运输追踪、变性束路追踪、神经元质膜荧光染色 化学神经解剖法：酶组织化学、免疫组织化学、免疫电子显微镜 原位杂交法 受体及转运体定位法 神经系统功能活动形态定位法：脱氧葡萄糖法、Fos法、细胞色素氧化酶法 形态学的观察法（Confocal） 二、机能学方法 1. 神经递质释放量的测定 推挽灌流 脑内微透析术 伏安法 脑片 突触体 抗体微探针 2. 神经递质的功能测定 微电泳 抗体微量注射 3. 行为方法 经典条件反射 操作式条件反射 三、电生理学方法 细胞外记录 细胞内记录 脑内电刺激 电压钳 膜片钳 脑电波 诱发电位 四、脑成像方法 X线脑室造影 X线脑血管造影 脑超声 计算机辅助体层摄影（CT） 磁共振成像（MRI） 正电子发射体层摄影（PET） 单光子发射计算机体层摄影（SPECT） 五、其他 突触体、突触体膜和突触小泡的分离与制备 反相HPLC 受体的放射配体结合分析法 RT－PCR Northern Western Southern 等等 病理学 病理研究的范围和内容 基础科学 → 临床医学 疾病病理形态学的演变规律 疾病发病机制 发病机制过程中的形态变化 疾病的分子改变 疾病发病过程中的分子变化 形态学改变和临床表现的关系 病理改变在预后判断中的价值 病理研究设计原则 科学循证的原则 合理对照的原则 实事求是的原则 符合统计学原则 病理研究设计的要点 从临床实践中发现问题、提出问题 用适当的科学方法研究问题 实事求是总结问题，找出科学规律 技术的选择 依据问题决定使用的技术 以问题为中心，从不同层次应用不同的技术 注意细节 病例 —— 宁缺勿滥 材料 —— 准确真实 细胞系 —— 性状，明确无误 组织 —— 纯净 激光捕捉 单细胞 显微切割 精确定位 5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2 mRNA表达的影响 四、做论文真的需要智慧和思维？ 以《有效教学的理论与实践概略》为例：处理 “来龙”与“去脉”的关系 有效教学提出的背景（回顾过去） 有效教学的含义（兼顾过去、基于现实） 关于有效教学认识上的整体把握（兼顾过去、基于现实） 摈弃传统教学的“有效”经典陋习（兼顾过去、基于现实） 高度警惕“美丽错误”：新课程理念下的低效、无效教学（基于现实、瞄准未来） 有效教学的应然状态——有效教学到底是啥模样？（基于现实） 有效教学的达成（基于现实） 有效教学的资源（基于现实） 学科操作性个案纲要（基于现实） 有效教学“胎记”的尴尬与可能的嬗变：从有效教学走向优效（优质）教学（瞄准未来） 【关键词】 食管癌;组织因子途径抑制物-2;5-氮杂-2-脱氧胞苷;甲基化;免疫组化;逆转录聚合酶链反应;凋亡 ABSTRACT： Objective　To explore the effects of 5-Aza-2-deoxycytidine (5-Aza-CdR) intervention on the growth and proliferation of Eca9706 cell line and protein expression of tissue factor pathway inhibitor-2 (TFPI-2). Methods　Eca9706 cell line was treated by 5-azaCdR of different concentrations; MTT， flow cytometry， immunohistochemistry and