黑核桃叶片基因组dna提取方法比较研究-中国农学通报.pdf

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黑核桃叶片基因组dna提取方法比较研究-中国农学通报

中国农学通报 2011,27(28): 125-129 Chinese Agricultural Science Bulletin 黑核桃叶片基因组DNA提取方法比较研究 1 2 2 1 1 2 1 张 丽 ,黄学琴 ,吴全忠 ,李 苗 ,陈虞超 ,刘立武 ,宋玉霞 1 2 (宁夏农业生物技术重点实验室,银川750002 ;宁夏中宁轿子山林场,宁夏中宁755100) 摘 要:探索从富含多酚和多糖等次生代谢物质的黑核桃叶片中获得高质量DNA 的提取方法。以黑核 桃与核桃叶片为材料,采用SDS、CTAB 和改良CTAB 3 种DNA 提取方法对黑核桃与核桃基因组DNA 提取效果进行比较研究,并通过琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度计检测所提取样品的质量;SDS 与 CTAB 法重复性较差,提取的黑核桃DNA 易降解;改良CTAB 法可有效抑制酚类物质及细胞内多糖对 DNA 纯度的影响,对样品提取的DNA 也无降解现象,纯度较高,得到的DNAA260/A280 值均处于1.80~ 1.95 之间;改良CTAB 法是适用于高质量黑核桃DNA 的提取方法。 关键词:黑核桃;核桃;叶片;DNA 提取 中图分类号:S664.1 文献标志码:A 论文编号:2011-0822 ComparisonofDNAExtractionMethodsfromLeavesofBlackWalnuts 1 2 2 1 1 2 1 ZhangLi,HuangXueqin,WuQuanzhong,LiMiao,ChenYuchao,LiuLiwu,SongYuxia 1 (Ningxia Key Laboratory for Agro Biotechnology,Yinchuan750002; 2Forest of Ningxia Zhongning Jiaozishan,ZhongningNingxia755100) Abstract: TheaimwastoobtainthehighqualityDNAextractedmethodfromleavesofblackwalnutwhich contained polysaccharides and polyphenolic compounds. Using leaves of Black walnut and walnut as experimentalmaterials,thegenomicDNAextractionofthreemethodsnamelySDS,CTABandmodifiedCTAB werecompared.TheDNAsamplesextractedbythreemethodsweretestedbyagarosegelelectrophoresis, ultravioletspectrophotometer.TheresultsshowedthatrepeatabilityofthemethodsofSDSandCTABwere poor,itwasdifficulttoobtainclearbandsbyagarosegelelectrophoresis.UtilizingmodifiedCTABmethod, formation of oxidized polyphenolic compounds could be inhibited and most of polysaccharides in the cytoplasmiccouldbere

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