ter）、葡萄球菌属（Staphy妣）；主要霉菌有地霉属.PDF

安徽农业科学。Journal0fAnhui姆i．Sci．2007，35(3)：680—681 责任编辑罗芸责任校对罗芸 植物组织培养污染原因分析及外植体的消毒 胡凯，张立军”，白雪梅，崔玉娜，阮燕晔(沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳110161) 摘要归纳了组织培养中污染原因及不同污染原因所造成的表观现象，并概括了解决外植体引发污染的方法。 关键词植物组织培养；污染；外植体；灭茵 文献标识码A 文章编号0517—6611(2007)03一00680一02 中图分类号Q943．1 oftheCauseofContaminationand Sterilizatioa缸PlantTissueOallm'e Aralysis Exlamt ItU蹦et of Scienceand 110161) al(CollegeBiological Abstractmainfocusinthis wass山[I】n】arizethei'easousof ofdifferentcau％of The articletO contamination，the apparentphenomena themethodhowto thecontaminationfromthe in tissueculture． prevent explantplant wordsPlanttissue Key culture；Contamination；Explant；Sterilization 从德国植物生理学家Haberlandtl902年提出设想到现 在，植物组织培养的研究已有100多年的历史，近几十年来 植物组织培养技术发展最为迅速。然而植物组织培养一些 技术环节仍然存在不少问题，其中污染、褐化、玻璃化被认为 (Rhizopus)等(周俊辉等，2a92)。 是组织培养的三大杀手。与褐化、玻璃化相比污染更易发 造成污染的原因很多，从时间角度可以将污染发生原因 生，给科研和生产实践带来巨大的危害。因此采取有效的防 归纳为3个阶段：①前期准备阶段。包括培养基灭菌不彻 控措施，降低污染发生的机率，是组织培养成功的重要保障。 底、器皿的灭菌不完全，外植体的选择不当与消毒不彻底；② 在众多污染途径中，外植体携带微生物污染组织培养是最常 无菌操作阶段。包括无菌操作室灭菌和超净工作台有问题， 见且不易解决的问题。笔者通过对相关文献的分析，并结合 操作不规范，操作工具的消毒不彻底等；③培养阶段。培养 实践，归纳了组织培养过程中引起污染的原因及各种污染的 环境不清洁和培养体系意外开放等。 表观现象，提出解决外植体引发污染的措施。 组织培养中，是否污染通常通过观察培养过程中培养基 1污染的原因及其表观现象 是否出现菌落来判断。不同成因造成的污染表观现象大多 污染就是在组织培养过程中微生物进入培养体系，在外 存在差异。通过对同批培养材料的菌落位置、菌落数、出现 植体上、外植体周围的培养基以及培养基的其他部位生长。 时间的观察，即可初步判断出污染的原因。例如，对于培养阶 由于植物组织培养过程中的温度、湿度、营养、pH值等适宜 段中的污染，虽然发生时间不确定，但是组织培养周期一般在 微生物的生长，因此一旦微生物进入培养容器中就将快速繁 30d左右，因此在前2～3d污染发生的概率比此后的概率低得 殖，通过营养竞争、侵蚀植物材料、分泌有毒代谢产物等途径 多，一般在培养较长时间后才观察到菌落的出现；而超净工作 使植物材料发生病害或死亡，造成组织培养的失败。造成污 台或操作人员导致的污染则在培养几天后即可观察到，因此可 染最常见的微生物是细菌和霉菌，有时也可以是酵母菌。主 以根据不同的