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干扰β-catenin信号通路对人胃癌细胞株miRNA表达谱的影响
摘要
摘 要
目的：
AGS MGC-803
本研究拟通过构建慢病毒载体介导干扰人胃癌 、 细胞系中
β-catenin信号通路的活性,利用miRNA芯片技术寻找干扰后差异表达的miRNA
表达谱，为进一步了解β-catenin信号通路及相关miRNA调控胃癌的机制打下基
础。
方法：
构建干扰β-catenin 基因 （ctnnb 1）的慢病毒，分别感染人胃癌AGS 和
MGC-803 PCR WesternBlot
细胞系。实时荧光定量 和 检测干扰效率。
将AGS细胞分两组：1）实验组：AGS干扰组，2）对照组：AGS细胞组；
将MGC-803细胞分为两组：1）实验组：MGC-803干扰组，2）对照组：MGC-803
细胞组。利用miRNA芯片筛选两种细胞干扰β-catenin后差异表达的miRNA，
并通过qPCR技术验证部分芯片结果。
结果：
1、成功构建干扰β-catenin 基因的慢病毒 LV3-CTNNB1-homo-433 与
LV3-CTNNB1-homo-769。LV3-CTNNB1-homo-433对AGS细胞及MGC-803细
胞均具有干扰作用，LV3-CTNNB1-homo-769 对AGS 细胞无干扰作用，对
MGC-803细胞有干扰作用。
2、感染LV3-CTNNB1-homo-433后，AGS细胞、MGC-803细胞中miRNA
表达谱产生明显变化。其中，AGS干扰组较AGS细胞组有40个miRNA上调，
32 miRNA MGC-803 MGC-803 56 miRNA
个 下调； 干扰组较 细胞组有 个 上调，
86个miRNA下调。
3、qPCR验证hsa-miR-135b-5p、hsa-miR-210表达，结果与芯片结果基本一
致。
结论：
干扰β-catenin信号通路对人胃癌AGS、MGC-803细胞的miRNA表达谱有
影响。
β-catenin信号通路可能通过调控miR-135b-5p、miR-210对胃癌产生影响。
II
万方数据
摘要
关键词：慢病毒、β-catenin信号通路、miRNA芯片、胃癌
III
万方数据
Abstract
ABSTRACT
Objective：
This studyusedLentivirusto disturbthe β-catenin signalingpathway inhuman
AGS and MGC-803gastric cancer cells,then detectedthe differential expression of
microRNAs (miRNAs) before and after interference via miRNA mic
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