一种新型ATP食品卫生检测仪研制.doc

一种新型ATP食品卫生检测仪的研制 1、引言 　　食品安全是一个直接关系到人民群众生命健康和社会稳定的重大公共安全问题，而细菌性污染又是其中极为重要的因素。如何能够快速、有效的检测食品中细菌的含量，是当今食品安全必然涉及的技术课题。目前检测细菌含量的主要方法如下： 　　（1）传统培养检测方法：传统培养法检测被称为“金标方法”,但其培养时间长且对检测条件以及检测人员的专业水平要求较高。 　　（2）ATP（三磷酸腺苷）生物化学发光法：利用细胞的特征来测定细菌数，是快速检测菌落总数的一个发展方向。这种方法可以在几分钟内得出结果，大大缩短了检测时间。 　　（3）其他检测方法：除了上述两种检测方法外，还有许多检测方法正在迅速发展。其中包括免疫学方法，分子生物学方法以及其他生物化学方法[1].这些检测方法各有千秋，但许多检测方法或因设备试剂比较昂贵、或因操作过程复杂、或因实验条件较为严格，不适用于食品卫生状况的现场检测。 　　可见ATP生物化学发光法具有极大的优点。但是目前大部分ATP卫生检测仪采用了光电倍增管（PMT）作为荧光探测器[2-3],闪光型荧光素酶作为检测试剂，导致体积较大，价格昂贵，仅适合实验室的验证工作，极大的限制了其在食品生产卫生检测过程中的应用。为了克服其缺点，本文采用新型硅光电二极管作为荧光探测器，辉光型荧光素酶作为检测试剂，设计出一种新型的ATP食品卫生检测仪，具有便携性、功耗低、高灵敏度和速度快的优点。 　　2、ATP生物化学发光检测方案 　　2.1 ATP生物化学发光检测原理 　　ATP是包括微生物在内的一切活生物细胞能量的来源。它在虫荧光素酶的催化作用下，与荧光素在有氧环境及二价镁离子的作用下释放出荧光，其反应式为[4]: 　　强度呈线性关系，用光度计测出发光强度，也就得到了细菌总数[5].这种方法可以在几分钟内得到结果，大大缩短了检测时间。 　　2.2 ATP生物发光酶的选择 　　当前商业化的ATP萤火虫荧光素-虫荧光素酶主要分为闪光型和辉光型两种： 　　（1）闪光型（Flash） 光在几秒钟内就能发射完。发光过程中光强很快到达峰值然后迅速下降（1-3s）[2]. 　　（2）辉光型（Glow） 有些商业化的荧光素酶检测系统采用特殊的方法，使得酶的活性高，产生的光强度强，在测试的几分钟之内可以保持稳定。 　　由于闪光型发光持续时间短，对此类型光进行测试必须要采用自动加样系统，这使得检测仪的体积增大，携带不方便，不利于对食品生产环境进行实时现场检测。本文采用辉光型酶作为检测试剂，只要在两分钟之内对试样检测即可，不需要自动加样系统克服了闪光型酶的缺点。 　　3、系统设计 　　3.1 硬件设计 　　仪器的硬件部分主要由取样测试室、电源模块、微弱荧光检测模块、校准模块、单片机控制模块、通信模块和人机对话模块等部分组成。仪器硬件结构如图1所示。 　　此测试仪在设计过程中面临的两个突出的难点在于仪器近乎苛刻的超低功耗要求和对超微弱荧光的检测。针对这两点，本文对电源模块和微弱荧光检测模块采取如下设计方案。 　　（1）电源模块由于仪器的便携特性，采用两节普通的1.5V碱性电池作为仪器的电源。利用具有电池反接保护功能的升压开关电源芯片MAX1833,将电池电压转化整个硬件系统的3.3V工作电压，和最大150mA的电流输出。此芯片静态电流为4μA,关断电流小于1μA,电源转换效率高达90%. 　　微弱荧光检测模块需要精度和稳定性要求更高的电源供电，本文选用美国国家半导体公司生产的低压差线形稳压芯片LP2982,可提供精准的3V电压和最大50mA的电流输出，具有输出电压精度1%,低噪声和关断电流小于1μA等特点。电源模块电路如图2所示。 　　以上供电模块的设计，具有电源转换效率高，静态漏电流低等优点。计算证明这样的设计可使仪器待机长达6个月。 　　（2）微弱荧光检测模块传统ATP检测仪采用PMT作为光电传感器，对试样所发出的荧光强度进行检测。由于PMT工作时需要正负高压电源供电，使得用其作为光电探测器的卫生检测仪体积较大且价格昂贵，不方便携带，极大的限制了此种检测仪的应用。本文采用日本滨松生产的s1227系列硅光电二极管作为光电传感器，具有体积较小，灵敏度高，暗电流小等优点。与PMT相比，硅光电二极管本身没有电流的放大作用，因此需要设计良好的放大电路将光电二极管输出的微弱电流进行放大。本文采取以下两种措施，很好的解决了微弱电流信号的放大问题： 　　① 选用高性能的集成运算放大器本文采用ADI公司生产的AD8605运算放大器芯片作为放大器。此放大器具有偏置电压低，输入电流低（pA级），电压电流噪声低等优点，是光电二极管放大电路的最佳选择。光电二极管采用光伏模式，可以非常精确的线性工作，无暗电流，整个电路的噪声低。 　　② 对整个微弱