冬虫夏草中腺苷含量的测定.doc

摘要 目的：建立用HPLC法测定冬虫夏草及含片中腺苷的含量。方法：C18(4.6mm×250mm,5um)色谱柱，0.05mol·L-1磷酸二氢钾+甲醇（90+10）为流动相，流速为1.0ml·min-1,检测波长260nm，柱温为35℃。结果：腺苷含量在0.005～0.2ug(r=0.9998)范围内呈良好的线性关系。平均回收率为99.49%，RSD=1.47%。 结论：方法准确可靠、、结果稳定、重现性好，分析速度快，可有效控制制剂的质量。 关键字：HPLC；冬虫夏草菌粉；含片；腺苷；DAD Abstract Objective: to determine the content?of adenosine?Cordyceps powder?andtablets by?HPLC method.?Methods: kromasil--C18?( 4.6mm?× 250mm ,?5um) column,?using methanol?two hydrogen?0.5mol?? L-1?phosphoric acid?(90:10)?as mobile phase,?the flow rate was 1.0ml?? min-1,?the detection wavelength was 260nm,?the column temperature was 35℃.?Results:?adenosine?in?0.005 ~ 0.2ug?(r=09998)?showed a good linear relationship?in the range of.?The average recovery was 101.16%,?RSD=1.47%.?Conclusion: the?method is Conclusion: the method is accurate and reliable, strong specificity, results stability, good reproducibility, which can effectively control the quality of the preparation. Keywords:?Cordyceps sinensis powder;?tablet;?adenosine;?HPLC目录 摘要 I Abstract II 1. 前言 2 1.1 仪器与试药 2 2. 实验条件 2 2.1 供试品提取溶剂的选择 2 2.2 检测波长的选择 2 2.3 流动相的选择 2 3. 试验方法与结果 3 3.1 分析溶液 3 3.1.1 对照品溶液制备 3 3.1.2 供试品溶液制备 3 3.2 色谱条件 3 3.3 分析方法学考察 3 3.3.1 系统适应性试验 3 3.3.2 标准曲线绘制及线型范围考察 4 3.3.3 精密度试验 4 3.3.4 重复性试验 4 3.3.5 稳定性试验 4 3.3.6 加样回收率试验 4 3.3.7 样品测定 4 4. 讨论 5 4.1 5 4.2 5 4.3 5 参考文献： 6 致谢 7 1. 前言 冬虫夏草，仅仅是我国190多种虫草中的一种，也是中药传统的滋补药材。冬虫夏草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，主要活性成分是虫草素，是中国特有的虫生真菌，其有调节免疫力功能、抗肿瘤、抗疲劳等功效。在药理学现代研究结果中，青海冬虫夏草含有约7%，糖类28.9%，脂肪约8.4%，蛋白质约25%。冬虫夏草中82.2%为不饱和脂肪酸[1]Agilent1100高效液相色谱仪，配置在线脱气机、高压泵及梯度洗脱装置、自动进样器、C18(4.6mm×250mm,5um)色谱柱、光电二极管阵列检测器（DAD）、Agilent色谱工作站、JD—500E超声波清洗器，优普超纯水机。 （2）腺苷标准品（上海永叶生物科技有限公司），水为UP水，甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 （3）冬虫夏草、冬虫夏草含片在青海省格尔木市冬虫夏草雪域专卖店购买。 2. 分析测定前的准备 2.1试验样品的预处理 首先为了试验结果具有代表性，选择青海玉树品质优良的冬虫夏草。冬虫夏草和含片通过研钵研成粉末，这样有利于30%乙醇提纯。在样品预处理过程中应该防止引入其他杂质和腺苷含量的损失。 2.2 试验提取样品溶剂的选择 由于腺苷的含量较低，干扰成分多，曾采用药典方法及文献报道［2,3］的方法，用90%甲醇和15%甲醇提取，均分离不好，拖尾严重，后经多次实验，采用30%乙醇超声提取后，蒸干，进行检测，峰形的对称性比较好，并消除了腺苷峰的拖尾现象及干扰峰，取得了较好的分离效果。 2.3 HPLC检测器波长的选择 取腺苷标准品溶液适量，调节波长在200~