动植物油脂 甘三酯分子2-位脂肪酸组分的测定 征求意见稿.pdf

GB/T24894—XXXX

动植物油脂甘三酯分子2-位脂肪酸组分的测定

1范围

本文件描述了动植物油脂的甘三酯分子2-位脂肪酸（β或内位）组分的测定方法。

本方法适用于熔点低于50℃的含四碳原子到二十二个碳原子的饱和的和不饱和的脂肪酸的油脂，或

在酯交换反应开始后10分钟内在50℃的反应混合物中变成液体的油脂。

本方法不适于含有下列组分的油脂：

——含有少于四个碳原子的脂肪酸；

——含有多于二十二个碳原子的脂肪酸；

——含有羟基脂肪酸（如：蓖麻油酸）。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB5009.168-2016食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定

GB5009.229食品安全国家标准食品中酸价的测定

GB/T5524动植物油脂扦样

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T15687动植物油脂试样的制备

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中游离脂肪酸中和后，经柱层析净化，用酶将甘三酯水解成2-单甘酯，经薄层层析（TLC）分

离，用气相色谱测定脂肪酸组分含量。

5试剂

所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682要求的二级水。

5.1用于试样净化的试剂

5.1.12-丙醇或乙醇：95%（体积分数）。

5.1.2正己烷或石油醚：沸程范围30℃-60℃。

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5.1.32-丙醇：50%（体积分数）或乙醇：50%（体积分数）。

5.1.4氢氧化钠溶液：0.5mol/L。

5.1.5酚酞溶液：1g酚酞溶于100mL95%（体积分数）乙醇中。

5.1.6活化的中性氧化铝：用于柱层析。最近在260℃温度活化2h的中性氧化铝，达到活性Ⅰ级，保

存在干燥器中。

5.1.7氮气。

5.2用于甘三酯水解的试剂

5.2.1无水乙醇，采用活化分子筛3Å脱水72小时以上，含水不超过700mg/L。

5.2.2固定化南极假丝酵母脂肪酶（CAL-B），拉丁名称Moesziomycesantarctica（Candida

antarctica，Pseudozymaantarctica）。储存在干燥的冰箱里。

注1：商品化的CAL-B包括：Novozym435（丹麦诺维信），IM-NE100(无锡蔚蓝生物），LipaseCL‘Amano’IM（日

本天野），CHIRAZYMEL-2C4（瑞士罗氏诊断）或其他同等的CAL-B脂肪酶。

注2：PLU（PropylLaurateUnit）是月桂酸丙酯单位，对应于规定的标准条件下1分钟内产生1µmol月桂酸丙酯所

需的酶活性的量。

注3：脂肪酶制剂的活性浓度由制造商说明。

5.3用于分离2-单甘酯的试剂

5.3.1乙醇：95%（体积分数）。

5.3.2正己烷或石油醚：沸程范围30℃-60℃。

5.3.3丙酮。

5.3.4硅胶：含有粘合剂，用于薄层层析。

5.3.5展开剂：正己烷或石油醚+乙醚+98%甲酸=70+30+1。

5.3.6显示剂：2’,7’-二氯荧光黄乙醇溶液（2’,7’-Dichlorofluorescein）：2g/L。100mL溶液加1

滴1mol/L氢氧化钠溶液使呈微碱性。

5.4用于气相色谱分析2-单甘酯的试剂

参见GB5009.168-2016的第3章。

6仪器

6.1用于试样净化的仪器

6.1.1水浴锅：在30℃-40℃之间能恒温控制。

6.1.2层析柱：用于层析分离，内径13mm、长400mm的玻璃管，配有烧结玻璃过滤板和活塞开关。

6.1.3旋转蒸发器：配有250