5.生物催化的介质系统(Xu).ppt

与普通有机溶剂最大的区别在于：①离子液体不会挥发(没有蒸气压)，对环境比较友好，用于工业生产也相对比较安全；②它们与许多有机溶剂互不相溶，可以形成有机溶剂-离子液体两相系统或者有机溶剂-水-离子液体三相系统，从而为溶剂工程在生物催化反应中的应用提供了新的可能。一般而言，离子液体通常有三种方式被应用于生物催化过程：①作为单一的溶剂；②作为共溶剂添加于水相系统中；③与水形成两相系统。生物催化剂离子液体反应体系发表年份大肠杆菌碱性磷酸酯酶[H3NEt][NO3]对硝基苯酚磷酸酯水解1984鸡蛋清溶菌酶[H3NEt][NO3]蛋白质复性2000红球菌R312完整细胞[BMIM][PF6]/缓冲液1,3-二氰基苯的生物转化2000面包酵母整细胞[BMIM][PF6]/缓冲液酮的还原2001嗜热蛋白酶[BMIM][PF6]阿斯巴甜的合成2000?-胰凝乳蛋白酶[OMIM][PF6][BMIM][PF6]N-乙酰-L-苯丙氨酸乙酯与1-丙醇的转酯化2001?-半乳糖甘酶[MMIM][MeSO4]/bufferN-乙酰氨基乳糖的合成2002甲酸脱氢酶[MMIM][MeSO4][4-MBPy][BF4]辅酶NADH的再生2002南极假丝酵母脂肪酶[BMIM][PF6][BMIM][BF4]醇解、氨解等2000多种脂肪酶[BMIM][PF6][BMIM][CF3SO3][BMIM][BF4][BMIM][(CF3SO2)2N][BMIM][SbF6]烯醇的动力学拆分2001南极假丝酵母脂肪酶,洋葱假单孢菌脂肪酶数种离子液体(R,S)-1-苯乙醇的动力学拆分;葡萄糖的区域选择性酰化2001南极假丝酵母脂肪酶[BMIM][(CF3SO2)2N]在超临界CO2存在下酶促酯化1-辛醇2002荧光假单孢菌脂肪酶[BMIM][PF6]手性磷化合物的拆分20022.8无溶剂或寡溶剂反应系统液相(酶液)固态底物或者产物无溶剂或寡溶剂固态反应物系统在许多情况下，反应系统的最佳选择可能是根本不用溶剂(即solvent-freesystem，无溶剂系统)，或者只用很少量的溶剂(littlesolventsystem，寡溶剂系统)。在至少有一种反应物为液体的情况下，反应物之间的质量传递可以通过流体相进行。例如，在用脂肪酶催化各种手性醇的对映选择性转酯化反应中，经常使用过量的醋酸乙烯酯或醋酸异丙烯酯作为酰基供体，同时兼作反应介质(无需外加溶剂)，一般效果非常好，已在工业规模广泛应用.3.非水介质系统中的影响因素3.1溶剂的影响在水溶液中，水分子与维持酶的活力构象的主要作用力(包括范德华力、盐桥、氢键等)均有关系，因此去除蛋白质分子周围的水势必会改变蛋白质的稳定性；另一方面，由于水在酶与底物的结合中起关键作用，因此在非水相环境中，酶的底物专一性也将发生变化。非水溶剂对酶选择性的影响人们普遍认为分子催化的推动力来自于结合能。既然酶与底物的结合能取决于酶－底物复合体的能量与溶液中酶和底物的能量之差，因此两者的结合必然受到溶剂的影响。非水溶剂对酶稳定性的影响过去人们一直以为，酶在有机溶剂中很不稳定。这一错误观念长期阻碍了非水相酶学的发展。1984年，美国麻省理工学院(MIT)的Klibanov教授用一个非常简单的实验事实彻底地改变了人们对有机溶剂中酶稳定性的看法。有机溶剂能增加酶构象的刚性，尤其是在低水含量的疏水性有机溶剂中，从而提高酶的热稳定性。由于疏水溶剂基本上不与蛋白质发生反应，因此悬浮于疏水介质中的蛋白质的热稳定性通常要高于在亲水介质中的稳定性。酶在有机溶剂中的稳定性与冻干前水溶液的pH、盐的浓度以及是否存在底物类似物等因素有关。非水溶剂的选择原则在所有含溶剂的生物催化系统中，溶剂的性质会在很大程度上影响酶的活性、选择性和稳定性。其中起关键作用的是溶剂的极性。降低介质的介电常数将导致酶分子中带电残基之间静电作用力的增加。这可能会降低酶分子的柔性(flexibility)，进而降低酶催化的活力。溶剂的疏水性越强，其夺取酶分子必需水的能力越弱。logP是衡量物质疏水性强弱的一个特征参数,P=C正辛醇/C水3.2水活度的影响必需水酶都溶于水，只有在一定量的水存在的条件下，酶分子才能进行催化反应。所以酶在有机介质中进行催化反应时，水是不可缺少的成分之一。有机介质中的水含量多少对酶的空间构象、酶的催化活性、酶的稳定性、酶的催化反应速度等都有密切关系，水还与酶催化作用的底物和反应产物的溶解度有关。酶分子只有在空间构象完整