化验室操作规程.doc

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受控状态：

化验室操作规程

文件编号：DHX—SC—29

编制人员：杜春华

审核：刘军宏

批准：黄得喜

2015年11月21日发布2015年12月21日实施

北京德惠祥食品有限责任公司

水分测定标准操作规程

1目的：规范水分测定操作，确保测定结果准确性。

2范围：适用于本公司产品水分测定。

3程序

3.1称量瓶干燥

1）取干净称量瓶一个，放置于恒温干燥箱中，将瓶盖打开或放置于瓶边；

2）将恒温干燥箱温度设定为105℃，开启加热对称量瓶进行干燥，待温度升至105℃时，开始计时1小时；

3）将干燥后的称量瓶盖上盖子，取出放置于干燥器中，冷却0.5小时，称量；

4）将称量瓶再次加热干燥，直至前后两次瓶重差不超过2mg，即为恒重。

3.2样品干燥

1）取代表性样品20g，将样品约5g放入研钵中，磨碎；

2）取恒重的称量瓶，加入2g左右磨碎后的样品，称量，放入干燥箱中，加热至105℃，干燥2小时；

3）将干燥后的称量瓶和样品盖上盖子，取出放置于干燥器中，冷却0.5小时，称量；

4）将样品再次加热干燥，直至前后两次瓶重差不超过2mg，即为恒重。

3.3结果计算

样品中水分含量按一下公式计算

X=（m1-m2）/（m1-m3）*100

X：样品中水分含量，%；

m1：干燥前样品和称量瓶重量，g；

m1：干燥后阳平和称量瓶重量，g；

m3：称量瓶重量，g。

4注意事项

4.1操作过程中不能用手直接接触称量瓶，应佩戴线手套；

4.2每个样品测定需要两个平行样品，且两次测定结果绝对差值不得超过其平均值的5%；

4.3样品或瓶重量测定以最后一次干燥的样品或瓶重为准，如果后一次重量比前一次增加，则以前一次测定结果为准。

菌落总数测定标准操作规程

1目的：规范菌落总数测定操作，确保测定结果的准确性。

2范围：适用于公司产品菌落总数的测定。

3程序

3.1药品及器具制备

1）按药品说明书配制营养计数琼脂培养基（140ml/样品），放置于三角瓶中，盖塞，放入高压蒸汽灭菌中，121℃灭菌15分钟；

2）每个样品配制225ml生理盐水（0.85%），放入盐水罐中，另配制9ml生理盐水2管，盖塞，放入高压蒸汽灭菌器中，121℃灭菌15分钟；

3）每个样品按10ml吸管1根，1ml吸管2根，培养皿7个，用纸分别包好，放入干燥箱中，160℃灭菌2小时；

4）将灭菌后的样品和器具取出，冷却至室温；

5）将缓冲间及无菌室内紫外灯在实验前打开0.5小时，对空气进行灭菌。

3.2接种和培养

1）取代表性样品50g，取25g样品放入225ml灭菌后的生理盐水中，混匀，制成1:10稀释液；

2）取1:10稀释液1ml放入9ml灭菌后的生理盐水中，混匀，制成1:100稀释液，换另外一根吸管取1：100稀释液1ml放入另外9ml生理盐水中，混匀，制成1:1000稀释液；

3）从1:10、1:100、1:1000稀释液中各取1ml放入灭菌后的培养皿中，每个稀释度做两个培养皿，同时做空白对照。

4）将冷却至46℃的营养计数琼脂培养基倒入接种后的培养皿中，每个培养皿15-20ml，待琼脂冷却凝固后，将培养皿反转，放入温度为36℃的恒温培养箱中，培养48小时。

3.3计数

1）用肉眼观察，记录培养皿上菌落数量，选择培养皿上菌落在30-300之间记录，超过300时记录为多不可计，每个稀释度菌落采用两个平板的平均数；

2）如果其中一个平板有较大菌落生产时，则不采用，应以无片状菌落生产的平板作为菌落数计算，如过片状菌落不到平板的一半，而其余一半菌落分布均匀，可计算半个平板后乘以2计算；

3）如果平板上菌落无明显界限的链状生长时，按照每条单链作为一个菌落计算。

3.4报告

1）如果只有一个稀释度菌落在计数范围内，按照两个平板菌落数的平均值乘以稀释倍数报告；

2）如果有两个连续稀释度的平板菌落在计数范围内，按照下面公式计算：

N=∑c/（n1+0.1n2）d

N：样品菌落数，cfu/g；

C：各平板菌落数之和，cfu

n1：第一稀释度平板个数，个；

n2：第二稀释度平板个数，个；

d：稀释因子（第一稀释度）。

3)如果所有稀释度菌落数都大于300，报告为最高稀释度菌落数两个平板数平均值乘以稀释倍数；

4）如果所有稀释度菌落数都小于30，报告为最低稀释度菌落数两个平板平均值乘以稀释倍数；

5）如果所有稀释度菌落数都不在30-300之间，其中一部分大于300，另外一部分小于30，报告为最接近30或300的菌落数乘以相应稀释倍数；

6）如果所有平板都没有菌落生长，报告为小于1乘以最低稀释倍数

7）菌落总数