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;1.阐明将目的基因导入受体细胞的方法。
2.阐明目的基因及其表达产物的检测鉴定的方法。;三、将目的基因导入受体细胞;1.将目的基因导入植物细胞的方法
(1)农杆菌转化法
①农杆菌特点:;表达;核心归纳;②在植物授粉后一定时间内,剪去柱头,将DNA溶液滴在花柱切面,使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。;2.将目的基因导入动物细胞;②转基因动物的制备过程;3.将目的基因导入微生物细胞;将目的基因导入不同细胞的方法;(1)为培育抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵作为受体细胞()
(2)细胞Ti质粒上的T-DNA可转移到植物细胞内,并且与其染色体DNA整合在一起()
(3)可以将目的基因直接导入受体细胞();;2.在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,一定要将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上的原因是什么?;3.将基因表达载体导入农杆菌时,应怎样处理农杆菌?;4.图中过程①利用什么了技术?其原理是什么?;5.在制备转基因动物的过程中常用的受体细胞是什么?原因是什么?;;2.下列关于将目的基因导入受体细胞的说法中,正确的是(多选)
A.农杆菌在自然条件下不侵染单子叶植物的原因是单子叶植物产生的酚
类化合物有刺激性
B.将目的基因导入动物细胞采用最多的方法是显微注射法
C.为使大肠杆菌易吸收DNA分子,应先用一定浓度的CaCl2溶液进行处理
D.在显微注射法中,不需要先构建基因表达载体;四、目的基因及其表达产物的检测鉴定;在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记,以此作为探针,使探针与基因组DNA杂交,若出现杂交带,则目的基因插入成功。;(2)从RNA方面进行检测
①检测方法:分子杂交技术
②检测目的:检测目的基因是否转录出相应
的mRNA。
③基因探针:用放射性同位素或荧光标记的含有目的基因的DNA片段。
④检测过程:如图;(3)从蛋白质方面进行检测
①检测方法:抗原—抗体杂交法。
②检测目的:检测目的基因是否翻译出特定的蛋白质。
③检测过程:如图;转基因生物;类型;核心归纳;(1)DNA分子杂交遵循碱基互补配对原则()
(2)基因探针是用放射性同位素或荧光标记的已???DNA片段()
(3)检测目的基因是否成功表达可用抗原—抗体杂交法()
(4)基因工程是否成功需进行个体生物学水平的鉴定();;2.怎样检测成功导入的目的基因是否转录出相应的mRNA分子?;4.目的基因表达出蛋白质是不是就意味着基因工程取得了成功呢?如不是,还需怎样检测?;;4.在检测抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中,不属于分子水平的是
A.观察害虫吃棉叶是否死亡
B.检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带
C.检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带
D.检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带
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