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二 动物细胞工程
教学目的
动物细胞工程的主要技术——动物细胞培养、动物细胞融合和单克隆抗体(A:知道)。
重点和难点
单克隆抗体
教学过程
【板书】
动物细胞培养
动物细胞融合
动物细胞工程 单克隆抗体的制备
单克隆抗体
单克隆抗体的应用
【注解】
动物细胞培养
(一)培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清(与植物组织培养基的区别)
取材:动物胚胎细胞或出生不久的幼龄动物的器官或组织
分离细胞
方法:用胰蛋白酶
(二)过程 原代培养
传代培养 10代左右
细胞株:40-50代
细胞系:无限传代(部分遗传物质发生了改变,具癌变特点)
(三)应用:
生产有重要价值的蛋白质生物制品
培养用于移植的组织或器官
检测有毒物质
进行生理、病理研究,为治疗和预防疾病提供理论依据
【例析】
.在动物细胞培养过程中,出现遗传物质改变的细胞是(A)
A.细胞系 B.细胞株 C.原代细胞 D.传代细胞
.下列属于动物细胞培养与植物细胞培养区别的是(A)
A.培养基成分不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株
二、动物细胞融合
与植物体细胞杂交的比较
相同:动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的,诱导融合的方法类似。(如都可用聚乙二醇PEG)
不同
物体细胞杂交在植物原生质体融合后,还有把杂种体细胞培育成新个体这一步骤。而动物细胞融合则无这一步。
动物细胞融合常用灭活的病毒。
(二)最重要的用途——制备单克隆抗体
三、单克隆抗体
(一)与血清抗体的区别
单克隆抗体:由单个B细胞通过无性繁殖(克隆)形成细胞群,由它们产生出化学性质单一,特异性强的抗体。
血清抗体:从动物血清中分离所得的抗体,产量低、特异性差、纯度低,反应不够灵敏。
(二)制备
小鼠脾脏B淋巴细胞+小鼠的骨髓瘤细胞
(经过免疫、效应) 灭活病毒或PEG(融合后有个筛选问题,剔除相同细胞的融合细胞)
具效应B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力
杂交瘤细胞
具骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力
挑选出能产生特定抗体的细胞群、继续培养(用选择培养基选出能产生单克隆抗体的)
体内或体外培养
单克隆抗体
(三)应用
对理论研究有重要意义
实践中的应用:疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性非常明显。(治疗癌症的“生物导弹”)
四、哺乳动物的胚胎移植
【例析】
.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可得到大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是(A)
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的B淋巴细胞
.下列有关克隆的叙述,不正确的项目是(D)
A.生物通过体细胞进行的无性生殖 B.将肿瘤细胞在体外培养成一个细胞系
C.扦插和嫁接实质上也是克隆 D.将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA中
(克隆可以理解为“复制”、“无性繁殖”,若排除基因突变的话,前后代是完全一样的,是从一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子,细胞或个体。)
【同类题库】
动物细胞工程的主要技术——动物细胞培养
.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于(A)
A.培养基不同 B.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株
C.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 D.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能
.在进行动物细胞培养时,通常选用的培养材料是(D)
A.衰老退化的动物组织细胞 B.成熟动物个体的体细胞
C.动物的受精卵细胞 D.动物胚胎或幼龄个体的细胞
.为了使用于培养的动物组织分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液,选取来的动物组织应先用下列哪种物质处理(B)
A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.盐酸 D.胰脂肪酶
.动物细胞培养过程中,当培养至50代后,这时的细胞具有癌变的特点,它们属于并称为(D)
A.原代培养 细胞株 B.
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