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实验一 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
教学目的
初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
实验原理
1.可溶性还原糖+斐林试剂((浅蓝-棕-)砖红色沉淀
呈色反应 2.脂肪+苏丹Ⅲ染液(橘黄色(+苏丹Ⅳ染液(红色)
3.蛋白质+双缩脲试剂(紫色反应
实验程序
一、可溶性还原糖的鉴定
选材:含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。
制浆
制备组织液 过滤(用一层纱布)
取液
呈
色
反
应
(注:斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用)
结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。
关键步骤:斐林试剂现用现配及用量。
二、脂肪的鉴定
取材:花生种子(浸泡3-4小时)将子叶削成薄片
(1)最理想的薄片
(2)在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液(2-3min)
制片 (3)去浮色
(4)制成临时装片
观察:在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察。
结论:脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。
关键步骤:子叶削成理想薄片。
三、蛋白质的鉴定
选材与制备组织样液:卵清或黄豆(浸泡1-2d)
呈
色
反
应
结论:蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
关键步骤:先加试剂A再加试剂B。
实验的注意事项
还原性糖:分子中含有醛基的糖。如葡萄糖、果糖、麦芽糖。但是蔗糖不是。
斐林试剂很不稳定,帮应将组成斐林试剂的甲液(0.1g/ml的NaOH溶液)和乙液(0.05g/ml的CuSO4溶液)分别配制、储存,使用时,再临时配制,将4-5滴乙液滴入2ml甲液中,配完后立即使用。
双缩脲试剂的使用,应先加试剂A(0.1g/ml的NaOH溶液),造成碱性的的反应环境后,再加试剂B(0.01g/ml的CuSO4溶液)。否则,紫色会被Cu(OH)2的蓝色遮蔽。
【同类题库】
.在还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,最佳的一组实验材料是(D)
①甘蔗的茎 ②油菜子 ③花生种子 ④梨 ⑤甜菜的块根 ⑥豆浆 ⑦鸡蛋清
A.④⑦⑥ B.⑤①⑦ C.①②⑥ D.④③⑥
.从某生物体细胞中提取出物质A和B,分析其化学元素组成:A中主要含有C、H、O、N等元素,B 中主要含有C、H、O、N、P等元素。A与双缩脲试剂会产生颜色反应,B则易被碱性染料染成深色。由此推断:A物质是 ,B物质是 。
.使用斐林试剂检验还原性糖的正确顺序是(D)
①制组织样液
②加入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液
③加入0.01g/ml CuSO4溶液
④加入0.05g/ml CuSO4 溶液
⑤煮沸2 分钟
⑥出现砖红色沉淀
A.①→②→③→⑤→⑥ B.①→(②+③)→⑤→⑥
C.①→②→④→⑤→⑥ D.①→(②+④)→⑤→⑥
.用斐林试剂鉴定可溶性还原性糖时,溶液的颜色变化过程为(A)
A.浅蓝色→棕色→砖红色 B.无色→浅蓝色→棕色
C.砖红色→浅蓝色→棕色 D.棕色→绿色→无色
.有关斐林试剂和双缩脲试剂的说法正确的是(A)
A.两者的NaOH浓度相同 B.两者的CuSO4浓度相同
C.实验时只能采用课本中给定的浓度 D.用两者鉴定物质时都不需要加热
.在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择,叙述错误的是(A)
A.甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定
B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料
C.大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料
D.鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料
.鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品,需用的化学试剂是(B)
A.斐林试剂 B.苏丹Ⅲ溶液 C.双缩脲试剂 D.红墨水
.(多选)鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,需用的化学试剂是(ABC)
A.斐林试剂 B.苏丹Ⅲ溶液 C.双缩脲试剂 D.红墨水
.下列能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀的是(D)
①葡萄糖 ②果糖 ③蔗糖 ④麦芽糖 ⑤淀粉 ⑥纤维素
A.①②⑤ B.②③④ C.①⑤⑥ D.①②④
.(多选)下列关于实验操作步骤的操作中,正确的是(BE)
A.用于鉴定可溶性还
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