抗肿瘤药物筛选评价技术--南京凯基生物科技发展公司.ppt

体内抗肿瘤活性试验 分组当日开始给药，根据不同药物的代谢动力学和毒性反应等确定给药方案。 给药途径应与推荐临床用药的途径相同。 给药次数较多，或被试物质溶解性较差，静脉给药有困难时，可考虑使用腹腔给药，但在评价药效时要注意这两种给药途径是有差别的。 可采取瘤周、瘤内、肌肉、皮下给药途径。 腹水瘤试验时一般不能应用腹腔给药途径。 给药方案和给药途径 试验设计 腹水瘤模型 接种给药后，观察和记录动物死亡时间，计算生存天数。如阴性对照组20%动物存活时间超过4周，表明腹水瘤生长不良，实验作废。 裸鼠移植瘤模型 推荐使用测量瘤径的方法，动态观察受试物抗肿瘤的效应。 肿瘤直径的测量次数根据移植瘤的生长情况而定，一般为每周2-3次,每次测量同时还需称鼠重。 免疫缺陷小鼠皮下移植的肿瘤很少发生转移，多数死于原发肿瘤。而临床肿瘤病人大多死于肿瘤转移，动物和临床肿瘤病人的死亡原因不同。因此，对于人癌异体移植试验，生命延长率并不是理想的观测指标。 体内抗肿瘤活性试验 体内抗肿瘤活性试验 裸鼠皮下移植瘤模型 肿瘤体积(tumor volume,TV)的计算公式为：V = 1/2×a×b2 或π/6×a×b×c 其中a、b、c分别表示长宽高。两公式的相关性极好，可采用任一公式。 根据测量结果计算出相对肿瘤体积（relative tumor volume，RTV）， RTV = Vt / V0。 其中V0为分笼给药时(即d0)测量所得肿瘤体积，Vt为每一次测量时的肿瘤体积。 抗肿瘤活性评价指标为相对肿瘤增殖率T/C（%） TRTV T/C % = ────×100% CRTV TRTV：治疗组RTV ；CRTV：阴性对照组RTV。 疗效评价标准：T/C % 60 %为无效；T/C % ≤60%，并经统计学处理P0.05为有效 评价标准 体内抗肿瘤活性试验 原位接种模型 小鼠肿瘤模型 生长较慢小鼠肿瘤采用与裸鼠移植瘤同样的测量瘤径的评价方法。 生长较快小鼠肿瘤可采用称瘤重的方法评价。试验结束后处死动物，称体重，解剖剥离瘤块，称瘤重。阴性对照组肿瘤平均瘤重小于1克，或20%肿瘤重量小于400毫克，表示肿瘤生长不良，试验作废。 给药组平均瘤重-阴性对照组平均瘤重 肿瘤生长抑制率 = ───────────────── ×100% 阴性对照组平均瘤重 评价标准 肿瘤生长抑制率40%为无效；肿瘤生长抑制率≥40%，并经统计学处理P0.05为有效 不同原位接种模型可采用不同评价方法， 主要有瘤重和生存时间评价法。如肝原位接种可用瘤重评价，颅内接种可用生存时间评价。评价方法、标准和注意事项同腹水瘤模型和小鼠肿瘤模型。 评价标准 南京凯基生物科技发展公司 联系电话：025 025抗肿瘤药物评价技术 南京凯基生物科技发展公司 联系电话：025 025抗肿瘤药物药效学指导原则 细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原则 化学药物一般药理学研究技术指导原则 中药、天然药物一般药理学研究技术指导原则 指导原则 体内抗肿瘤试验必须选用三种以上肿瘤模型，其中至 少一种为人癌裸小鼠移植模型或其它人癌小鼠模型。 试验结果三种模型均为有效，再重复一次也为有效 体外实验选用10-15株人癌细胞株 ，至少重复一次 2 3 抗肿瘤药物药效学研究的要求 体内、体外实验方法相结合；以体内实验为主 1 南京凯基生物科技发展公司 联系电话：025 025体外抗肿瘤活性试验 对候选化合物进行初步筛选 了解候选化合物的抗瘤谱 为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考 试验目的 体外抗肿瘤活性试验 试验方法 选用10-15株人癌细胞株 试验还应考察受试物对耐药肿瘤细胞系和正常人源细胞的作用和影响 使用MTT还原法、磺酰罗丹明B(SRB)染色法 药物与细胞共培养时间一般为48-72 小时，贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。 试验应设阴性、阳性、溶媒对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药。 试验至少应重复一次