吸附离子交换技术.ppt

吸附离子交换技术 离子交换色谱(Ion exchange chromatography, IEC)是应用最广泛的色谱技术,自从上世纪五十年代开始应用于生物物质的分离离子交换色谱以离子交换剂作为固定相,以合适的缓冲溶液作为流动相,流动相中的带电溶质与离子交换剂之间静电作用力存在差异,从而使得目标溶质得以分离。 离子交换作用的原理是,离子交换剂骨架上的功能基团在水溶液中会发生解离,解离后的功能基团能够与溶液中其他带有同种电荷的离子发生交换。这个离子交换的过程是等当量的,离子交换剂以及溶液都始终保持电中性,交换过程是可逆的,经过一段时间最终达到平衡。由于不同离子与功能基团的作用力大小不同,溶液中的不同的带电溶质通过这种可逆的离子交换作用达到对其的分离提纯以及浓缩。 1、离子交换技术在植物脱色中的应用 1.1离子交换树脂概述 在工业应用中，树脂脱色的优点主要是处理能力大，脱色范围广，脱色容量高，能除去各种不同的离子，可以反复再生使用，工作寿命长，运行费用较低。以离子交换树脂为基础的多种新技术，如色谱分离法、离子排斥法、电渗析法等，各具独特的功能，可以进行各种特殊的工作，是其他方法难以做到的。树脂精制的应用，是近年来国内外制糖工业的研究的重点课题，是实现糖业现代化的重要标志。 甜菜糖厂普遍采用碳酸石灰法除杂，国外一些甜菜糖厂将二碳清汁顺序通过阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，将糖汁中的非糖分除去。 这种处理能除去多数盐类和有机杂物，提纯效果很好。这种方法的缺点是糖汁在第一树脂柱变为酸性，加大了糖的损失。1964 年前苏联糖厂开始使用磺酸基钠型阳离子树脂，结合强碱性阴离子树脂，发现脱色效果良好，且脱色工艺受甜菜质量影响很小。 林乐新对白糖精制工艺研究发现，糖液脱色适宜用两级树脂柱串联组合。第一级采用丙烯胺系弱碱性阴离子树脂，其脱色范围广、吸附容量大、耐污染，起主要的脱色作用；第二级采用苯乙烯系强碱性阴离子树脂，其吸附能力强，可以彻底地去除有色物。 王元凤研究了树脂用于茶多糖的脱色，茶多糖溶液中的色素以天然色素和生产中产生的色素为主，色值比菊粉提取液更大。试验发现大孔吸附树脂适宜从极性溶液中吸附非极性物质，最后选定 D315 弱碱性阴离子树脂，其脱色效果最好，并推测茶多糖溶液中主要以带负电的非极性小分子量物质为主。 曹云研究了 8 种大孔吸附树脂和 4 种离子交换树脂对灵芝多糖溶液的脱色影响，发现含特殊功能基的阴离子树脂 D392 对灵芝多糖的脱色效果最好，该功能基能与反离子结合相对牢固，增加了反离子与色素的离子交换，同时树脂功能基改善了骨架的亲水性，增加了树脂骨架与色素分子的接触面积，从而增强了脱色效果。另外研究表明，灵芝多糖色素以阴离子型分子为主，其次还有少量的弱极性和非极性分子。 蛋白质的离子交换吸附行为受到很多因素的影响,根据其吸附作用机理,主要的影响因素有被吸附蛋白质的种类，吸附剂表面化学性质,吸附剂的结构特性,pH,盐浓度和温度在确定了被吸附蛋白体系以及离子交换介质的前提下,在进行等温条件下的吸附行为研究时,蛋白质种类、吸附剂、温度一定,该体系的吸附行为主要的影响因素如下: 蛋白质在与离子交换介质进行离子交换吸附时,蛋白质所带的电荷是由 pH值控制的。流动相的 pH 值与蛋白质等电点 pI 的关系决定了蛋白质与阳离子交换介质还是阴离子交换介质作用。当 pH 值高于待分离蛋白的 pI 值时,蛋白质将带净的负电荷,与阴离子交换介质作用;当 pH 值低于待分离蛋白的 pI 值时,蛋白质将带净的正电荷,与阳离子交换介质作用。蛋白质与交换介质的作用强度也与pH 值相关,同种离子交换作用体系,当 pH 与 pI 相距越远则蛋白质带电荷越多,离子交换作用越强。因此,对于特定蛋白的离子交换体系的吸附,要根据需要选择比较合适操作的 pH 值。 离子强度对蛋白质离子交换吸附行为的影响主要体现在:通常,相同的离子交换体系,在保持其他条件不变的情况下,蛋白质的离子交换吸附随着离子强度的增大而减弱。溶液的离子强度主要取决于其盐的种类以及盐浓度的大小。盐的类型对蛋白质保留行为的影响主要包括强的顶替作用、弱的顶替作用以及中间顶替作用,通过影响蛋白质的离子交换而影响蛋白质在离子交换色谱中的保留行为、分离度以及回收率。故在具体蛋白质的离子交换色谱的应用中,强顶替作用的盐将降低蛋白质的保留时间,弱顶替作用的盐将影响蛋白质的回收率,故一般选择中间顶替作用的盐。  3.1 肝素的提取 肝素属于黏多糖，在体内与蛋白质结合成复合体，这种复合体无抗凝血活性；当除去蛋白质后，其药用功能显示出来。肝素提取一般包括肝素一蛋白质复合物的提取、肝素一蛋白质复合物的分解和肝素的分级分