乳腺癌SHP-1基因甲基化状态及其对细胞增殖及凋亡影响.pdf

目 录 一、摘要……………………………………………………………………1 (一)中文摘要…………………………………………………………1 (二)英文摘要…………………………………………………………3 二、正文……………………………………………………………………5 (一)前言………………………………………………………………5 (一)丹!J舌……“”…”“…”…”………………………一………””…’ (二)第一部分乳腺癌细胞中Sm．1基因的甲基化状态 材料和方法……………………………………………………7 结果………………………………………………………···1l 讨论…………………………………………………………12 (三)第二部分：5．氮杂胞苷对S唧一1基因去甲基化作用的研究 材料和方法…………………………………………………13 结果…………………………………·……………………一16 讨{仑·…………·…·……·…··………··……………··……··20 (四)结论……………………………………………………………22 (五)参考文献………………………………………………………23 OOO………………小……………………………26 三、综述……………OOO (一)综述…………………………………………………………26 (二)参考文献………………………………………………………32 五、致谢…………………………………………………………………37 乳腺癌SHP-1基因甲基化状态及其对细胞增殖 与凋亡的影响 硕士生姓名：王琨 指导教师：赵作伟教授 专业名称：外科学 摘要 目的：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率在全球范围 内呈逐年上升的趋势。尽管在乳腺癌的早期诊断和治疗等方面我们取得了一定的 进展，但全球每年仍有约50万的女性死于乳腺癌，目前乳腺癌发病率已位居女性恶 性肿瘤首位。近年来随着环境、生活方式的变化、生活水平的提高以及饮食结构 改变等原因，我国乳腺癌的发病率也呈逐年上升趋势，严重危害着广大女性的心 身健康和生活质量。 肿瘤的发生、发展是不同致癌因素通过不同的途径激活原癌基因和(或)使 抑癌基因失活导致细胞增殖和凋亡失调所致。目前对表观遗传学的重要研究内容 为DNA甲基化，认为人类的发育和肿瘤疾病的发生与DNA甲基化有着密切关系， 特别是CpG岛甲基化异常状态所致的抑癌基因失活及癌基因激活问题。最近研究 证明，乳腺癌中基因表型的改变，在肿瘤的发生与发展过程中起到重要作用，特别 是抑癌基因DNA的甲基化表达异常，被称为是重中之重。SHP一1基因是近年来发现 的抑癌基因，是众多蛋白酪氨酸激酶之一，主要表达在造血细胞中被称为造血细胞 cell 磷酸酶(hematopietic 可以调节细胞内信号蛋白分子酪氨酸的磷酸化水平，抑制细胞的增殖、分化和活 性。 虽然SHP一1基因对肿瘤的抑制功能已经被证实，但其在乳腺癌细胞中作用机 制是怎样产生作用的仍不十分清楚，其表达的调控机制等也尚未完全明确。本研 究以乳腺癌MCF一7细胞系为研究对象，检测乳腺癌中SHP-1基因的甲基化状态，并 和凋亡的影响，探讨SHP一1基因甲基化在乳腺癌发生发展中的作用，为乳腺癌的诊 断和治疗提供新的依据和方向。 方法：④用甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR，MSP)和非甲基化 特异性PCR(unmethylation—specific 甲基化状态，MSP、U13一MSP方法分别检测接受和未接受去甲基化处理的乳腺癌MCF-7 n2 andthe BreastcancerSHP·-1 condition