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第一章发酵工程

1．发酵工程定义

定义1：发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有

用的产品，或直接把微生物细胞为产品的工业生产过程。

定义2：发酵工程是指在最适发酵条件下，在发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的技

术。

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2．发酵工程的发展历史大致可分为三个阶段：○传统（古老）发酵技术阶段（纯培养技术

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建立之前）○近代发酵技术阶段（20世纪20年代—70年代）○现代发酵技术阶段（20世

纪70年代以后）

3．为什能利用微生物进行发酵生产：微生物繁殖速度快，代谢能力强，易培养，容易改造

代谢产物多样，能利用廉价的有机物、无机物。

4．发酵工程的特点（与化学工业相比）1原料广泛2生产安全、设备简单3反应专一性强、

副产物少4代谢多样、应用广泛5易受污染、无菌要求严格6菌种的优劣影响较大。

第二章工业用微生物菌种

1．工业用菌种的特点及要求：1具有稳定的遗传学特性2能利用低价的原材料3长条件易

于满足4于细菌，具有抗Phage的能力5酵周期短，降低生产成本6谢产物无毒无害

2．发酵工业常用微生物从菌种的遗传学特征上可以把菌种分为：野生型和改良型从微

生物分类学的角度分为：1细菌类2酵母菌3霉菌4放线菌

3．菌种选育的目的：防止菌种退化，提高生产能力，简化生产工艺，开发新产品

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4．菌种选育方法：○基因突变—自然选育，诱变育种○基因重组—杂交育种（原生质体融

合），基因工程

5．自然选育：利用微生物自然突变进行菌种选育的过程，一般惯称为菌种的分离纯化。

6．自然选育的目的：纯化菌种、复壮菌种、稳定生产、提高产量。

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自然选育方法步骤：○通过表观形态来淘汰不良菌株（初筛）○通过目的代谢物产量考察（副

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筛）○菌种纯度试验（纯度验证）○传代稳定性试验（传代试验）。

7．各种生产菌适宜的保藏方法——酵母菌：定期移植斜面低温保藏法，石蜡油保藏法

曲霉菌：砂土保藏法真菌（只长菌丝不长孢子的菌）：采用液氮超低温冻结保藏，

石蜡油保藏法细菌：斜面低温保藏法，冷冻干燥保藏法放线菌：砂土或冷

冻保藏法

8．菌种的退化：生产菌株遗传标记的丢失，导致生产能力下降，即负突变,称为菌种的退化

9．菌种退化的原因：内因—基因突变，分离现象，质粒脱落；外因：保藏方法不当，营养

条件不适，传代次数过多

10．防治菌种退化的措施：从菌种选育方面考虑：控制传代次数,合理传代，采用不易衰退

细胞传代，采用有效的保藏方法

11．菌种衰退时应采取的提纯复壮措施：分离纯化，通过寄主体进行复壮，淘汰衰退的个体

12．种子扩大培养:指将保存的处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或

摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量纯种的过程。这些纯种培养物称为种

子。

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13．扩大培养的目的：○为发酵提供大量的、新鲜的、具有较高活力的菌种○驯化菌种

14．优质种子具备的特征①活力强②生理性状稳定③适宜的菌体总量和浓度④不带杂

菌⑤良好的生产性能（高产、稳定）

15．培养基选择的原则：培养基的原料比较精细，质量较高。C/N比大有利于长孢子

N源丰富,有利于长菌丝

16．车间种子接种方法:微孔接种法——孢子悬浮液接种，火焰保护接种法——摇瓶菌丝接

种，压差接种法——罐与罐间的移种

17．种子罐的级数:指制备种子需逐级扩大培养的次数。

18．接种龄：菌体从开始至移入下一级罐的培养时间

19．接种量：种子液体积和接种后培